乳腺癌中FHIT基因異常和肌上皮細胞免疫標記物的研究.pdf

1、 目前常用的MEC標記物主要有S-100、SMA(smoothmuscleactin，SMA)、calponin、SMMHC(smoothmusclemyosinheavychain，SMMHC)、CD10、p63等。目前的研究主要集中于上述一種標記物在標記MEC的敏感性和特異性上。對于各種標記物敏感性和特異性的系統(tǒng)比較還未見報道。而且各種標記物聯(lián)合應用能否彌補各單一標記物的缺陷，也未見報道。因此，系統(tǒng)比較上述各標記物的敏感性和特

2、異性，以及篩選各標記物的最佳聯(lián)合搭配，是本課題的另一重要內容。研究結果如下： (1)乳腺癌組織中FHIT基因的LOH陽性率在36例有信息個體中，至少有一個位點發(fā)生LOH的有12例，LOH的總陽性率為33％(12/36)。FHIT在位點D3S1295、D3S1313和D3S4260的LOH陽性率分別是23％、23％和17％。 (2)FHIT基因在乳腺癌中的異常甲基化38例乳腺癌標本中，有16例(42％)發(fā)生了FHIT基因的

3、甲基化改變，48例正常對照組織中，5例(10％)出現(xiàn)了甲基化的擴增。FHIT的異常甲基化和乳腺癌的組織學分級呈正相關(P＜0.05)。乳腺癌組織和周圍的正常對照組織中，都出現(xiàn)了非甲基化的擴增(100％)。 (3)FHIT基因在乳腺癌中的表達38例腫瘤組織中，13例表達FHIT蛋白，陽性率為34％(13/38)。FHIT蛋白的表達和乳腺癌的組織學分級相關，在Ⅲ級乳腺癌中的表達率顯著低于Ⅰ+Ⅱ級中的表達率(P＜0.05)。

4、(4)FHIT基因的等位性缺失、甲基化和蛋白表達的關聯(lián)性分析在發(fā)生LOH的12例乳腺癌中，有9例發(fā)生了異常甲基化(9/12)；在發(fā)生ROH的26例乳腺癌中，有7例發(fā)生了異常甲基化(7/26)，異常甲基化在LOH的病例中的發(fā)生率顯著高于在雜合性保留(retentionofheterozygosity，ROH)的病例中的發(fā)生率(P＜0.01)。因此可以得出，在乳腺癌中，F(xiàn)HIT基因的等位性缺失和異常甲基化呈正相關。 12例發(fā)生FHI

5、T基因等位性缺失的病例中，只有2例表達FHIT蛋白；而未發(fā)生等位性缺失的26例乳腺癌中，有11例表達FHIT蛋白。FHIT基因的等位性缺失和蛋白表達呈負相關(P＜0.05)。 (5)cyclinD1在乳腺病變中的表達8例不伴有異型增生的乳腺良性病變均不表達cyclinD1，陽性率為0％(0/8)；2例導管上皮異型增生的病例有1例表達cyclinD1，陽性率為50％(1/2)；6例導管原位癌中，1例表達cyclinD1，陽性率為1

6、7％(1/6)。34例浸潤性癌中，14例表達cyclinD1，陽性率為41％(14/34)。cyclinD1在乳腺良性病變中的表達(10％)低于惡性病變中的表達(38％)，但二者相比沒有顯著性差異(x2=3.529，p＞0.05)。但乳腺異型增生病例中的陽性表達率(38％，16/42)顯著高于正常型增生及無增生的病例(0％，0/8)(x2=4.482，P＜0.05)。在和乳腺癌的臨床病理學參數間的相關性分析中，cyclinD1的表達和乳

7、腺癌的臨床病理學參數間沒有相關性。 (6)Ki-67在乳腺良、惡性病變中的表達10例乳腺良性病變中(8例不伴有導管上皮異型增生和2例伴有導管上皮異型增生)，都有極少數的Ki-67陽性細胞，這些陽性細胞主要是肌上皮細胞，少部分為乳腺上皮細胞。由于Ki-67陽性細胞數不到乳腺實質細胞總數的10％，因此10例乳腺良性病變都是Ki-67陰性，陽性率為0％(0/10)。6例導管原位癌中，3例表達Ki-67，陽性率為50％(3/6)，34例

8、浸潤性癌中，有22例表達Ki-67，陽性率為65％(22/34)。Ki-67在乳腺癌中的表達(25/40)顯著高于在良性病變中的表達(0/10)，(P＜0.01)。Ki-67在乳腺浸潤性癌的表達率(65％)高于原位癌中的表達率(50％)，但二者相比差異不顯著(P＞0.05)。Ki-67表達和乳腺癌的組織學分級相關，Ki-67在組織學級別高的乳腺癌中表達率高。 (7)Bax在乳腺良、惡性病變中的表達Bax在乳腺良性病變中的陽性表達

9、率是30％(3/10)，在乳腺癌中的陽性率是67.5％(27/40)，Bax在乳腺癌中的陽性率顯著高于良性病變中的陽性(P＜0.05)。Bax的表達和乳腺癌的組織學級別正相關，在淋巴結轉移陽性病例中的表達顯著高于淋巴結轉移陰性病例中的表達。Bax表達和乳腺癌的其他臨床病理參數沒有相關性。 (8)FHIT，Ki-67，cyclinD1和Bax表達的關聯(lián)性分析通過統(tǒng)計學分析，F(xiàn)HIT在乳腺癌中的表達和Ki-67、cyclinD1的表

10、達呈負相關(P＜0.05)(P＜0.05)。FHIT和Bax的表達沒有相關性(P＞0.05)。Ki-67的表達和cyclinD1、Bax呈正相關(P＜0.05)(P＜0.05)。 (9)S-100在乳腺良、惡性病變中的表達在乳腺增生病、纖維腺瘤、導管內乳頭狀瘤和良性葉狀腫瘤等良性病變中，均可見S-100陽性的MEC環(huán)繞EC。但MEC的陽性細胞數多少不等，在30例良性病變中，MEC陽性率在30％～80％，主要在50％左右。而且乳腺

11、EC也表達S-100，EC陽性率小于MEC陽性率，一般在20％～50％。 (10)SMA和calponin在乳腺良、惡性病變中的表達在乳腺良性病變中，均可見SMA陽性的MEC呈花環(huán)狀完整地圍繞增生的小導管外周，所有的EC都是SMA陰性。在某些病例中，隨著導管上皮的增生，導管上皮巢不斷增大，上皮巢外周的陽性細胞變的更為扁平，由原來的花環(huán)狀環(huán)繞變?yōu)槌始毦€裝環(huán)繞于增生的上皮細胞巢的外周。乳腺增生病中可見一些囊性擴張的腺體，隨著腺腔的擴

12、大，腺腔周圍的陽性細胞也呈細線狀環(huán)繞。伴大汗腺化生的腺體外周可見SMA陽性細胞環(huán)繞，大汗腺化生的腺上皮細胞不表達SMA。導管內乳頭狀瘤中，呈乳頭狀增生的腺上皮不表達SMA，在腺上皮和纖維脈管束之間可見一層連續(xù)的SMA陽性細胞。 導管內癌中，有一例是囊內高分化乳頭狀癌，在纖維脈管束構成的軸心內可見大量的SMA陽性細胞。陽性細胞不是MEC，而是平滑肌細胞。其它導管內癌的病例中，癌細胞巢周圍可見大量陽性細胞環(huán)繞，陽性細胞不僅有MEC，

13、還有肌纖維母細胞和血管平滑肌細胞。環(huán)繞癌細胞巢的MEC由連續(xù)到不連續(xù)，甚至完全缺失。 (11)CD10在乳腺良、惡性病變中的表達良性病變中，幾乎所有的MEC都表達CD10，EC不表達CD10。有3例良性病變中可見少許EC表達CD10。伴大汗腺化生的腺體周圍可見陽性細胞環(huán)繞，化生的細胞表達CD10。 在導管原位癌中，癌細胞巢周圍可見陽性細胞環(huán)繞，陽性細胞由于受擠壓呈細線狀環(huán)繞。在浸潤性癌中，有3例癌細胞表達CD10。其他病

14、例中的癌細胞都不表達CD10。 在乳腺良性病變中，肌纖維母細胞和血管平滑肌細胞都不表達CD10。在30例乳腺癌的病例中，血管平滑肌細胞都不表達CD10，有5例發(fā)現(xiàn)有肌纖維母細胞表達CD10。 (12)p63在乳腺良、惡性病變中的表達在30例良性病例中，幾乎所有的MEC都表達p63。P63在導管內癌中的表達和CD10的表達基本一致，在2例中可見少許癌細胞表達p63。在浸潤性癌中，癌細胞都不表達p63，癌細胞巢周圍也不見p6