人IgA-IgM Fc受體：Fcα-μR的表達和功能分析.pdf

1、Fcα/μR是一種新發(fā)現(xiàn)的IgA和IgM的Fc受體。人Fα/μR為單基因家族成員，其基因位于1號染色體lq32區(qū)，毗鄰其它FcR基因，包括FcγR1a、FcγR2、FcγR3、FcγR1a和pIgR。小鼠的Fcα/μR高親和力的結合IgM，中等親和力的結合IgA。人Fcα/μR為Ⅰ型跨膜蛋白，包含有522個氨基酸和3個膜外區(qū)結構域。其中Ig樣結構域EC2與人、牛和小鼠的pIgR膜外區(qū)的第一個結構域有很高的序列同源性，提示這兩個受體間可能

2、存在親緣上和功能上的關系。小鼠的Fcα/μR表達在胸腺、脾、肝、腎、小腸和大腸、睪丸和一些成熟的B細胞和單核細胞上。人的Fcα/μR表達在腎、小腸和二級淋巴器官。 為了確定Fcα/μR在免疫系統(tǒng)中的作用，區(qū)分Fcα/μR與pIgR的表達和功能，本研究制備了抗Fcα/μR與pIgR的單克隆抗體。Fcα/μR與pIgR的膜外區(qū)分別構建到pET30a質粒中，在E.coli中表達。得到的包涵體蛋白經(jīng)純化后免疫Balb/c小鼠并進行細胞融

3、合。產(chǎn)生的單克隆抗體經(jīng)ELISA、流失細胞分析、Western blott和免疫組化分析鑒定。用確定的特異性抗體進行組織人多組織器官表達分析。 人多組織器官的免疫組化分析結果顯示，F(xiàn)cα/μR表達在腎小管上皮細胞和腎小球系膜區(qū)；脾、淋巴結和闌尾淋巴小結中的生發(fā)中心；還有散在于消化道粘膜固有層內的漿細胞上。而pIgR則主要集中在小腸、大腸、肺泡和膽囊的上皮細胞上。在其它組織，例如胃底腺、乳腺、睪丸、前列腺和心肌組織，F(xiàn)cα/μR與

4、pIgR均有不同程度的表達。Fα/μR在腦組織表達陽性。 于pIgR的表達相比，F(xiàn)cα/μR主要存在于兩種組織。其一是位于呼吸、消化和泌尿生殖等通道下層的淋巴組織；另一種是也同時表達pIgR的上皮細胞，如乳腺和腎。然而即使是在這種情況下，這兩個受體也會因表達在不同的側面而執(zhí)行不同的功能跨膜轉運或者吞噬的功能。 IgA腎病(IgAN)是一種最常見的腎小球炎癥，同時也是最主要的導致腎功能衰竭的原因。IgAN的發(fā)病機制還不清楚

5、。本文用針對Fα/μR的單克隆抗體檢測了相關的腎細胞。其中Fcα/μR表達在原代培養(yǎng)的人系膜細胞(HMC)和近曲小管上皮細胞(PTEC)上。在正常人近曲小管細胞系HK—2上，同樣檢測到了Fcα/μR的蛋白表達。 本實驗結果證明，表達在HK—2細胞上的Fcα/μR是一個功能性的IgA受體。用Fcα/μR的中和抗體可以特異性的阻斷HK—2細胞與pIgA2和血清IgA的結合，并且阻止HK—2吞噬IgA/IgM免疫復合物。 免疫