兩種富血小板纖維蛋白的降解特性研究.pdf

1、目的：從抽取人血液制備兩種富血小板纖維蛋白進(jìn)行的體外降解實(shí)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)動物口內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)兩個部分對比分析富血小板纖維蛋白和改良型富血小板纖維蛋白（Platelet-Rich Fibrin，PRF和Advanced Platelet-Rich Fibrin， A-PRF)的降解特性，評估其臨床應(yīng)用價值，為A-PRF膜和PRF膜的臨床應(yīng)用提供相關(guān)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1.體外降解實(shí)驗(yàn)：10名志愿者各抽取10ml肘靜脈血用以制取A-PRF和P

2、RF膜，A-PRF以Ghanaati法制備（1500rpm，14min），PRF以Choukroun法制備（2700rpm，12min）。制備好的A-PRF、PRF膜浸泡在人工唾液內(nèi)置于二氧化碳培養(yǎng)箱，每天記錄膜的物理狀態(tài)并測量膜標(biāo)本的重量。2.兔口內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)：36只實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分為A-PRF組（A組）和PRF組（B組），每只兔抽取10ml血液用以制備A-PRF或PRF膜， A-PRF(2000rpm，24min)，PRF(3250rpm

3、，10min)。將制備好的膜修剪成6mm直徑的圓形膜片。于每只兔硬腭處制備兩處模型：在距上頜內(nèi)側(cè)門牙4.5mm的腭中線處用環(huán)切鉆制備直徑5mm的軟組織缺損，剝離粘骨膜顯露骨面，并向周圍潛行分離1mm；在軟組織缺損下方2mm約一個腭皺襞處用手術(shù)刀片做邊長5mm的角形切口，翻全層粘骨膜瓣顯露骨面。A組在軟組織缺損區(qū)植入自體A-PRF圓形膜片，邊緣縫合固定（A1組，即A-PRF膜暴露組）；角形瓣內(nèi)植入A-PRF圓形膜片并縫合（A2組，即A-P

4、RF膜埋置組）。B組在兩處植入自體PRF圓形膜片，軟組織缺損區(qū)為B1組（即PRF膜暴露組），角形瓣區(qū)為B2組（即PRF膜埋置組）。四組每組18個實(shí)驗(yàn)樣本。在術(shù)后3d、5d、7d、10d、14d、21d，A、B兩組各隨機(jī)處死3只動物，取出位于上顎部的膜標(biāo)本，進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察并稱重計算降解率，掃描電鏡觀察降解過程，HE染色，觀察組織病理變化，進(jìn)行炎性評分。
　　結(jié)果：1.體外降解實(shí)驗(yàn)：①在人工唾液培養(yǎng)環(huán)境下，第14天所有PRF膜標(biāo)本均完

5、全降解，第17天所有A-PRF膜標(biāo)本均完全降解。②A-PRF和PRF膜的降解速度有差異（P＜0.05）。2.兔口內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)：①形態(tài)學(xué)觀察：術(shù)后第7d：A2和B2組創(chuàng)口基本愈合；術(shù)后第14d，A1和B1組創(chuàng)口基本愈合。術(shù)后第7d：B1組膜材料明顯吸收較難完整取出；術(shù)后第10d：B1組無可見標(biāo)本， A1組、B2組膜取出困難；術(shù)后第14d：A2組膜取出困難，A1組、B2組無可見標(biāo)本；術(shù)后第21d：A2組無法找到植入標(biāo)本。②降解情況：完全降解的

6、時間A1組14天，A2組21天，B1組10天，B2組14天。組間對比：A1、A2兩組膜標(biāo)本的降解率在前5個時間節(jié)點(diǎn)有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）；B1、B2組的降解率除第三天無統(tǒng)計學(xué)差異（P＝0.066>0.05），其余時間點(diǎn)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；A1、B1兩組膜第5天、7天、10天差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；A2、B2組在五個時間節(jié)點(diǎn)的降解率均有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。③掃描電鏡結(jié)果：A-PRF和PRF膜均呈三維

7、網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，由三叉結(jié)構(gòu)連接。降解過程中纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)逐漸崩解，表現(xiàn)為纖維蛋白條索的斷裂，網(wǎng)間孔隙增大，三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)逐漸不規(guī)則成形，膜降解為碎片，最終觀察不到明顯的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。④蘇木精-伊紅染色觀察：四組鏡下均表現(xiàn)為紅染的纖維蛋白條索逐漸減少，可見炎性細(xì)胞的浸潤，成纖維細(xì)胞和新生毛細(xì)血管數(shù)量逐漸增多。術(shù)后第3d、5d、7d，A1組炎性反應(yīng)都較A2組重（P<0.05），B1組炎性反應(yīng)也較B2組重（P<0.05）；術(shù)后10d， A1與A2間及B

8、1與B2組間炎性反應(yīng)無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：1.A-PRF與PRF膜均可在人工唾液中發(fā)生降解，PRF膜的完全降解時間為14天，A-PRF膜為17天，PRF膜在人工口腔環(huán)境中的降解速度比A-PRF膜快。2.在兔口腔內(nèi)，暴露條件加快了膜的降解。3.在兔口腔埋置條件下， A-PRF膜的降解速度慢于PRF膜。4.A-PRF和PRF膜不可單獨(dú)作為屏障膜使用。5.A-PRF和PRF膜的降解為纖維蛋白的降解和三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的崩塌