小檗堿對糖尿病大鼠血管神經功能損傷的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究小檗堿對糖尿病早期大鼠血管神經病變的改善作用。
  方法:鏈脲佐菌素(STZ,55 mg·kg-1)腹腔注射誘導制備糖尿病大鼠模型,動物隨機分為對照組、模型組和小檗堿給藥組,72 h后尾靜脈取血監(jiān)測血糖值,大于16.7 mmol·L-1視為誘導糖尿病大鼠模型成功。給藥組造模兩周后每天灌胃給予200 mg·kg-1小檗堿,持續(xù)2周。采用HE染色法觀察各組大鼠腸系膜血管形態(tài)學變化;運用電場刺激誘發(fā)神經源性收縮反應的離體血管平

2、滑肌張力分析方法,觀察糖尿病大鼠腸系膜上動脈、髂總動脈氮能神經和腎上腺素能神經功能的改變,以及小檗堿給藥對血管神經功能損傷的改善作用;同時測量電場刺激誘發(fā)兩種動脈氮能神經遞質一氧化氮及腎上腺素能神經遞質去甲腎上腺素釋放量的改變。
  結果:
  1.各組大鼠體重、血糖及腸系膜血管外觀的變化
  1.1.大鼠體重、血糖值的變化
  與同期對照組大鼠相比,模型組、小檗堿給藥組大鼠的體重明顯低于對照組大鼠體重(P<0.

3、01);與模型組大鼠相比,小檗堿給藥組大鼠的體重無明顯差異(P>0.05)。與同期對照組大鼠相比,模型組、小檗堿給藥組大鼠的血糖值明顯升高(P<0.01);與模型組大鼠相比,小檗堿給藥組大鼠的血糖值無明顯差異(P>0.05)。
  1.2.腸系膜血管的外觀變化
  新鮮取材腸系膜血管內淤血少,周圍脂肪組織飽滿;模型組血管內淤血嚴重,脂肪減少;小檗堿給藥組淤血較模型組有所減輕。
  2.大鼠離體腸系膜上動脈、髂總動脈神經

4、源性收縮反應的觀察
  2.1.電場刺激誘發(fā)大鼠血管平滑肌收縮反應的方法學考察
  對照組、模型組、小檗堿給藥組大鼠離體腸系膜上動脈及髂總動脈血管標本,電場刺激均可誘發(fā)穩(wěn)定可重現(xiàn)的頻率依賴性收縮反應,且收縮反應可被0.1μmol·L-1河豚毒素(TTX)阻斷。
  2.2.各組大鼠電場刺激誘發(fā)血管收縮反應的區(qū)別
  腸系膜上動脈中,與對照組相比,模型組的血管收縮反應無明顯差異(P>0.05);與模型組相比,小檗堿

5、給藥組的血管收縮反應無明顯差異(P>0.05)。髂總動脈中,與對照組相比,模型組血管的收縮反應性顯著增強(P<0.05);與模型組相比,小檗堿給藥組的血管收縮反應無明顯差異(P>0.05)。
  2.3.α-受體阻斷劑對電場刺激誘發(fā)大鼠離體血管反應的影響
  1μmol·L-1酚妥拉明給藥前后電場刺激引起收縮反應的差值反應腎上腺素能神經功能,腸系膜上動脈三組間無顯著性差異(P>0.05);髂總動脈模型組收縮反應的差值顯著增大

6、(P<0.01),模型組與小檗堿給藥組無顯著性差異(P>0.05)。
  2.4.一氧化氮合酶抑制劑對電場刺激誘發(fā)大鼠離體血管反應的影響
  0.1 mmol·L-1 N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)給藥前后電場刺激引起腸系膜上動脈收縮反應的差值反映氮能神經功能,與對照組相比,模型組的差值顯著減?。≒<0.01);與模型組相比,小檗堿給藥組的差值顯著增大(P<0.05)。
  0.1 mmol·L-17-硝基吲

7、唑(7-NI)給藥前后電場刺激引起腸系膜上動脈收縮反應的差值,與對照組相比,模型組的差值顯著減?。≒<0.05);與模型組相比,小檗堿給藥組的差值顯著增大(P<0.05)。
  L-NAME、7-NI給藥前后電場刺激引起的髂總動脈收縮反應的差值在三組大鼠間無顯著性差異(P>0.05, P>0.05)。
  2.5.一氧化氮合酶抑制劑對大鼠離體血管去甲腎上腺素(NA)量效曲線的影響
  在各組腸系膜上動脈和髂總動脈中,L

8、-NAME對NA收縮反應量效曲線無顯著影響(P>0.05);7-NI對NA收縮反應量效曲線均有抑制作用(P<0.01)。
  3.電場刺激誘發(fā)大鼠離體血管神經遞質釋放量的測量
  3.1.小檗堿對糖尿病大鼠腸系膜上動脈及髂總動脈一氧化氮(NO)釋放量的影響
  與對照組相比,模型組大鼠腸系膜上動脈NO釋放量明顯降低(P<0.01);小檗堿給藥組大鼠腸系膜上動脈NO釋放量較模型組明顯增加(P<0.01)。
  加入

9、7-NI或TTX后,三組大鼠腸系膜上動脈的NO釋放量均顯著減少(P<0.01)。
  三組大鼠髂總動脈NO釋放量無明顯差異(P>0.05)。加入7-NI后,模型組,小檗堿給藥組大鼠NO釋放量顯著減少(P<0.05)。加入TTX后,對照組、小檗堿給藥組大鼠NO釋放量顯著減少(P<0.05)。
  3.2.小檗堿對糖尿病大鼠腸系膜上動脈及髂總動脈去甲腎上腺素釋放量的影響
  三組大鼠腸系膜上動脈的NA釋放量無顯著性差異(P

10、>0.05)。
  與對照組相比,模型組大鼠髂總動脈NA釋放量明顯增加(P<0.05);與模型組相比,小檗堿給藥組大鼠髂總動脈NA釋放量無明顯差異(P>0.05)。
  4.各組大鼠腸系膜上動脈組織切片HE及免疫組化染色
  各組大鼠動脈血管HE染色明晰,彈性膜清晰可見,無明顯差異,神經節(jié)呈圓形或橢圓形或不規(guī)則形,分布在血管周圍。以對照組HE染色作為參照,脂肪細胞飽滿,神經節(jié)形態(tài)完整;模型組脂肪細胞皺縮,神經節(jié)腫脹變形

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