標記免疫的表面增強拉曼光譜研究.pdf

1、標記免疫技術是在免疫反應中加入標記示蹤物，利用抗原一抗體結合反應的特異性及各種標記物的可測量性來達到方便敏感地檢測各種體內微量生物活性物質。隨著標記技術在免疫學中的應用，精密的物理化學手段引進到免疫學實驗中，傳統(tǒng)的拉曼散射光譜信號較弱，作為信息讀出手段往往缺乏高靈敏性。而表面增強拉曼散射(SERS)可使信號增強6～10個數(shù)量級。SERS標記免疫檢測是一種將SERS與標記免疫學相結合，利用SERS的高靈敏度和光譜選擇性，結合抗體抗原的特異

2、反應作用而進行的納米標記免疫分析技術。這種新發(fā)展起來的標記免疫分析技術將生物分析技術、納米技術與SERS三者很好的結合。 本論文對SERS標記免疫檢測進行了較為系統(tǒng)的研究。研究基于類似三明治結構的構建，對金屬基底及納米粒子進行抗體修飾，基底上的固相抗體與標記抗體通過與抗原的結合形成“固相抗體-待測抗原-標記抗體”夾心復合物，利用修飾抗體對抗原的特異選擇性識別及金納米粒子與金屬基底間的電磁耦合對拉曼散射的有效增強效應，以標記物分子

3、的表面增強拉曼信號間接表達抗體對抗原的識別作用。在橫向上，對基底修飾制備及再生性、標記分子選擇、檢測靈敏度提高等方面進行了研究，獲得了重要的突破進展，得到了詳細的光譜信息，實驗中極大地提高了抗原檢測靈敏度，并且通過探索合適的洗脫試劑進行基底再生，得到了較好的效果。在縱向方面，成功地進行了單組分至多組分抗原的檢測；通過不同光譜特征分子對不同免疫溶膠進行對應標記，進而組裝三明治結構，并進行了大量的對比實驗，成功地進行了多組分抗原的同時識別檢