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文檔簡介
1、目的:
木犀草苷(Luteoloside, Lut)是一種廣泛存在于中草藥中的黃酮類化合物,具有保護心血管的作用。本實驗對H9c2心肌細胞進行Lut預處理,建立缺氧/復氧(anoxia/reoxygenation,A/R)損傷模型,研究Lut對受到缺氧/復氧損傷的心肌細胞的保護作用,并且探究Lut的保護作用是否與影響14-3-3η蛋白的表達有關。
方法:
本實驗采用H9c2細胞,對其進行Lut預處理并構建A
2、/R模型。利用MTS法檢測細胞存活率;分光光度計法檢測乳酸脫氫酶(LDH)的釋放;Western blot法檢測14-3-3η蛋白的表達水平;流式細胞技術測定細胞內的活性氧(ROS)水平;分光光度計法檢測線粒體通透性轉換孔(mPTP)的開放程度、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性;Western blot法檢測Bcl-2、Bax蛋白的表達水平;流式細胞技術測定細胞凋亡程度。
結果:
各實驗組細胞經過缺氧/
3、復氧處理后:
1.預處理Lut提高H9c2細胞存活率,降低LDH活性;
2.預處理Lut增加H9c2細胞內14-3-3η蛋白表達量;
3.預處理Lut降低H9c2細胞內ROS水平;
4.預處理Lut減弱H9C2細胞內mPTP開放程度;
5.預處理Lut降低H9c2細胞內Caspase-3活性;
6.預處理Lut上調Bcl-2蛋白的表達,下調Bax蛋白的表達;
7.預處
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