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文檔簡介
1、目的:
研究腫瘤壞死因子受體(TNFR)相關因子6(TRAF6)與樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)成熟性的關系。
方法:
建立膠原誘導性關節(jié)炎(CIA)小鼠模型,從小鼠股骨中提取骨髓細胞。重組小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重組小鼠白細胞介素-4(rmIL-4)誘導CIA小鼠骨髓細胞定向分化為未成熟樹突狀細胞(immature dendritic cell,iDCs
2、),將iDCs分為針對TRAF6的小干擾RNA(TRAF6-siRNA)轉染組、陰性siRNA轉染組和未轉染組。轉染后實時熒光定量PCR檢測TRAF6基因表達。脂多糖刺激siRNA轉染后的iDCs成熟,流式細胞術檢測DCs成熟程度,酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測DCs釋放的促炎癥性因子。
結果:
CIA小鼠造模成功率達84%。轉染TRAF6-siRNA組iDCs TRAF6 mRNA表達明顯低于陰性siRNA轉染組及未轉染組(
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