雙氫青蒿素對前列腺癌PC-3細胞HSP70基因表達的影響及調控機制研究.pdf

1、目的：探討雙氫青蒿素（dihydroartemisinin，DHA）對人前列腺癌細胞PC-3細胞株中熱休克蛋白70（heat shock protein70，HSP70）表達的影響，并探討其可能機制。
　　方法：第一部分（caspase依賴的凋亡途徑）：PC-3經(jīng)25、50和100μmol/L DHA作用48 h后，用流式細胞術檢測各組細胞凋亡率。用熒光定量PCR檢測細胞中HSP70 mRNA的表達。用Western blot檢測

2、細胞中HSP70、凋亡酶激活因子(Apoptotic protease activating facter-1,Apaf-1）及Caspase-3的表達。第二部分（非caspase依賴的凋亡途徑）：PC-3經(jīng)25、50和100μmol/L DHA處理48 h，用DNAladder檢測各組斷裂的DNA片段；免疫熒光檢測各組細胞中HSP70和AIF的定位及表達。用Western blot檢測細胞中HSP70、凋亡酶激活因子(Apoptosi

3、s inducing factor,AIF)的表達。熒光定量PCR及蛋白質印跡法增加兩組，即100μmol/L HSP70抑制劑槲皮素（quercetin）作為陽性藥物對照組，以DMSO作為溶劑對照組。
　　結果：各濃度組 DHA均可下調 HSP70 mRNA及蛋白表達水平（P<0.05）,誘導PC-3細胞凋亡（P<0.05），上調Apaf-1、Caspase-3及AIF蛋白表達水平（P<0.05）。
　　結論：DHA能抑制