淫羊藿苷對胃癌SGC-7901細胞內(nèi)CaSR及Survivin、Runx3基因表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過觀察淫羊藿苷(ICA)聯(lián)合鈣敏感受體(CaSR)活性改變對胃癌SGC-7901細胞增殖的影響,及其對細胞內(nèi)CaSR及Survivin、Runx3基因表達的影響,探討ICA抗腫瘤的相關機制,為臨床應用ICA治療胃癌提供實驗依據(jù),促進胃癌的有效治療,并促進中藥有效成分在抗腫瘤治療方面更好地發(fā)揮優(yōu)勢。
  方法:體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細胞
  1.ICA及ICA聯(lián)合CaSR活性改變對SGC-7901細胞增殖的影響

2、:采用噻唑藍比色法(MTT)測定經(jīng)遞增劑量ICA(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L)、ICA聯(lián)合CaSR激動劑(Calindol)和抑制劑(Calhex231),作用24 h、48 h及72 h后的SGC-7901細胞增殖抑制率。
  2.ICA聯(lián)合Calindol對SGC-7901細胞凋亡的影響:Hoechst染色法檢測ICA及ICA聯(lián)合Calindol對SGC-7901細胞作

3、用48 h后的細胞凋亡情況。
  3.ICA聯(lián)合CaSR活性改變對SGC-7901細胞內(nèi)CaSR、Survivin、Runx3基因蛋白和mRNA表達的影響:ICA聯(lián)合Calindol、Calhex231對SGC-7901細胞作用48 h后,Western blot技術檢測細胞內(nèi)CaSR、Survivin及Runx3基因蛋白的表達情況;RT-PCR技術檢測細胞內(nèi)CaSR、Survivin及Runx3基因mRNA的表達情況。
 

4、 4.統(tǒng)計學方法:全部實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0軟件包進行統(tǒng)計學分析,計量資料服從正態(tài)分布用均值(-x±S)表達,多組間比較采用方差分析,兩組間用SNK做兩兩比較;不服從正態(tài)分布采用中位數(shù)和四分位間距表達,組間比較采用秩和檢驗。計數(shù)資料用率表達,組間比較采用卡方檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
  結果:
  1.MTT結果顯示不同濃度的ICA分別作用于SGC-7901細胞24 h、48 h及72 h后,均有明顯

5、的抑制增殖的作用,與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P<0.05),隨著藥物濃度的增加及作用時間的延長,其作用效果越強,呈時間、劑量依賴性。
  2.不論作用24 h,48 h還是72 h,ICA聯(lián)合Calindol對SGC-7901細胞的抑制增殖作用明顯高于相同濃度的ICA或Calindol單獨作用于SGC-7901細胞的效果,與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P<0.05),且呈時間依賴性。
  3.經(jīng)Hoechst33342染色后,I

6、CA聯(lián)合Calindol對SGC-7901細胞的誘導凋亡的作用明顯高于相同濃度的ICA或Calindol單獨作用于SGC-7901細胞的效果。
  4.ICA和Calindol均能促進SGC-7901細胞內(nèi)CaSR、Runx3蛋白和mRNA表達上調(diào),Survivin蛋白和mRNA表達下調(diào);二者聯(lián)合后促進CaSR、Runx3表達上調(diào)和Survivin表達下調(diào)的作用效果明顯高于單獨作用,與對照組相比有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。

7、>  結論:
  1.ICA能夠明顯抑制SGC-7901細胞的增殖,且呈時間和劑量依賴性。
  2.ICA與Calindol聯(lián)合作用于SGC-7901細胞,其抑制增殖的效應明顯大于二者單獨作用于SGC-7901細胞,且呈時間依賴性。
  3. ICA能夠明顯誘導 SGC-7901細胞的凋亡,且 ICA與Calindol聯(lián)合作用于SGC-7901細胞后,誘導凋亡的作用明顯大于二者單獨作用的效果。
  4.ICA和C

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