初治骨髓增生異常綜合征HERG鉀通道的表達特點及臨床意義.pdf

1、目的：HERG鉀離子通道是一種電壓門控型的離子通道，它固有表達于心肌細胞、神經(jīng)元等人體組織細胞，參與調(diào)節(jié)動作電位復(fù)極化。數(shù)據(jù)顯示HERG鉀通道在多種腫瘤細胞上異常高表達，而對應(yīng)正常的細胞上無或低表達。在急性髓性白血病（AML）等非實體瘤中，HERG鉀通道通過促進癌細胞增殖，遷移，血管生成和耐藥，對腫瘤進展起到了促進作用。骨髓增生異常綜合征（MDS）由于高風(fēng)險向AML轉(zhuǎn)化，被認為是一種前AML（pre-AML）狀態(tài)。這些年來，人們發(fā)現(xiàn)MD

2、S和AML有許多共同的分子遺傳學(xué)異常。然而，初治MDS患者HERG鉀離子通道的表達特點及其對MDS發(fā)生發(fā)展的影響等問題尚未見報道。為此，本實驗探討了初治MDS中骨髓CD34+CD38-細胞HERG蛋白的表達特點，分析了HERG鉀通道蛋白的水平和MDS患者臨床資料之間的關(guān)系及其意義，并初步探索HERG鉀離子通道在MDS中的作用。
　　方法：本實驗研究對象為2014年三月至2015年二月期間在華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院血液科收

3、集的76例骨髓標本，其中包括36例MDS初治患者，20例正常對照和20名AML初治患者骨髓標本（陽性對照）。流式細胞術(shù)檢測表達HERG鉀離子通道的CD34+CD38-細胞占總CD34+CD38-細胞的比例，各組間比較分析其差異；同時結(jié)合臨床數(shù)據(jù)分析HERG鉀離子通道對于MDS患者的臨床意義，探討該通道蛋白與 WHO（2008）分型，血紅蛋白，中性粒細胞及血小板水平，染色體核型分析、IPSS預(yù)后積分的相關(guān)性；培養(yǎng)MDS細胞系SKM-1，運

4、用CCK-8增殖實驗及流式細胞術(shù)，觀察E-4031（HERG鉀離子通道特異性阻斷劑）作用于SKM-1前后其增殖、凋亡及周期的變動特點。
　　結(jié)果：MDS病例骨髓中CD34+CD38-細胞HERG鉀離子通道的表達比率顯著高于正常組（p＜0.01），且低于AML組（p＜0.05）。分析MDS患者臨床資料，我們發(fā)現(xiàn)表達HERG鉀通道的CD34+CD38-細胞比例在MDS各亞型組中存在差別（p＜0.01），且其比例隨著亞型組惡性程度增加而

5、升高；表達HERG鉀通道蛋白的CD34+CD38-細胞比例與中性粒細胞計數(shù)呈顯著負相關(guān)（ p＜0.05），與血小板水平呈顯著的負相關(guān)性（p＜0.01）；在染色體核型分析中，預(yù)后不良核型組表達HERG鉀通道的CD34+CD38-細胞比例要顯著高于預(yù)后良好核型組（p＜0.05）；隨著 IPSS預(yù)后積分的上升，MDS患者表達 HERG鉀通道 CD34+CD38-細胞比例隨之增加（p＜0.01）。此外，我們發(fā)現(xiàn)HERG鉀離子通道特異性阻斷劑E-

6、4031作用于SKM-1后，細胞的增殖顯著減弱，呈時間與劑量依耐性（p＜0.01），而對凋亡和周期的影響無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論：MDS骨髓中表達HERG鉀通道的CD34+CD38-細胞比例與對照組相比顯著升高，且其與MDS惡性程度呈正相關(guān)，與患者不良預(yù)后密切相關(guān)，表明HERG鉀離子通道有可能對MDS發(fā)生、發(fā)展有重要影響；且阻斷SKM-1細胞膜上的HERG鉀離子通道能顯著抑制SKM-1細胞的增殖，提示靶向阻斷HERG鉀通道有可能成