氧化石墨烯和離子液體在蛋白質分離檢測中的應用研究.pdf

1、蛋白質是重要的生命物質，在生命活動中扮演著至關重要的角色?？焖俑咝У牡鞍踪|分離鑒定是蛋白質組學研究中的關鍵環(huán)節(jié)。本論文將氧化石墨烯和離子液體引入蛋白質的分離和檢測，建立了蛋白質分離純化和定量分析的新方法，拓展了氧化石墨烯和離子液體在生命科學領域中的應用范圍。
　　第一章簡要綜述了蛋白質的分離純化和定量分析方法，氧化石墨烯和離子液體的性質及其在生物分析化學領域的應用進展。
　　第二章制各并利用GO/SiO2復合材料建立了選擇性

2、分離純化全血中血紅蛋白的新方法。通過靜電自組裝技術將氧化石墨烯固載在氨基改性的球形硅膠表面，采用紅外光譜、掃描電鏡和紫外-可見吸收光譜對所得的GO/SiO2復合材料進行了表征，氧化石墨烯在硅膠表面的固載量為2.3％(w/w，GO/SiO2)。對所得復合材料在血紅蛋白分離純化中的表現(xiàn)性能進行了考察。在pH7的條件下，3 mg GO/SiO2復合材料對1.0 mL70 mgL-1血紅蛋白的吸附效率為85％，吸附行為符合Langmuir模型，

3、最大吸附容量為50 mgg-1。吸附的血紅蛋白可采用pH8.9的Tris-HCl進行洗脫，洗脫率為80％。圓二色光譜和活性測試表明GO/SiO2復合材料具有良好的生物相容性，吸附洗脫過程對血紅蛋白的構象和活性不產(chǎn)生影響。將所建立的方法用于人全血中血紅蛋白的選擇性分離，純化的樣品采用SDS-聚丙酰胺凝膠電泳進行純度驗證，結果表明該方法分離得到后的血紅蛋白純度較高。
　　第三章制備了親水性離子液體1，3-二丁基咪唑氯代鹽(BBimCl

4、)，并利用其熒光性能建立了血紅蛋白的定量分析方法。BBimCl結構上高度對稱，因而具有較強的熒光性能，其水溶液中最大激發(fā)波長/發(fā)射波長為315 nm/388 nm，熒光量子產(chǎn)率0.523。由于BBimCl的陽離子與血紅蛋白中血紅素基團的鐵原子可以發(fā)生配位作用，因此血紅蛋白能強烈猝滅BBimCl的熒光，由此建立了血紅蛋白熒光測定方法。在BBimCl濃度為0.01mol L-1，pH7的條件下，可對3×10-7～5×10-5 mol L-1