Cathelicidin相關抗菌肽(CRAMP)在炎性腸病及哮喘小鼠模型中的免疫調控作用與機制.pdf

1、Cathelicidin是一類廣泛存在于脊椎動物體內的生物活性多肽，不同物種來源的家族成員cathelin區(qū)域高度保守。人與小鼠只發(fā)現(xiàn)一種Cathelicidin，分別命名為LL-37與CRAMP，兩者在結構、功能和組織分布等方面極為相似。針對LL-37/CRAMP的研究主要集中于其廣譜抗微生物活性，顯示其在抗感染中發(fā)揮直接殺傷、抑制作用。近年的研究表明，LL-37/CRAMP還作為重要的免疫調節(jié)分子發(fā)揮功能，在炎癥、自身免疫病以及腫瘤

2、等疾病中參與調控免疫病理過程。然而，LL-37/CRAMP的作用具有多重性，例如，可通過促進炎性細胞激活與浸潤表現(xiàn)促炎癥作用，也可阻斷TLR激活而發(fā)揮炎癥抑制作用;此外，在不同的疾病中表現(xiàn)出疾病惡化或保護作用。因此，在不同疾病的特異病理微環(huán)境下研究LL-37/CRAMP的免疫調控作用，對于深入了解其病理生理功能、探討新的疾病干預手段具有重要意義。
　　本課題旨在利用小鼠模型，研究CRAMP在哮喘和炎性腸病中的可能作用，揭示其在不同

3、病理微環(huán)境下的功能調控機制，并探討以其為靶點的治療干預策略在炎癥疾病中的應用潛能。研究主要包括:1.通過基于巨噬細胞RAW264.7的體外細胞實驗以及經(jīng)鼻腔給予小鼠外源性CRAMP的動物體內實驗，顯示合成的CRAMP可抑制LPS刺激RAW264.7產(chǎn)生TNF，在體內可誘導氣道炎性細胞浸潤及炎性細胞因子表達;2.以卵清蛋白(OVA)成功誘導了小鼠急性哮喘模型，外源性給予CRAMP影響了氣道炎性細胞因子水平、炎性細胞浸潤、過敏原特異抗體應答

4、類型與水平、以及肺組織病理變化，顯示CRAMP能夠加重過敏性氣道炎癥;3.分別以TNBS及Oxazolone誘導了克隆氏病與結腸炎兩種小鼠炎性腸病模型，顯示CRAMP在兩種不同T細胞應答病理機制主導的腸炎模型中具有顯著不同的表達水平，提示可能存在不同的病理角色;4.外源性CRAMP經(jīng)直腸給藥對Oxazolone誘導的小鼠腸炎進行干預，能夠通過下調炎性細胞及炎性細胞因子水平、上調組織損傷修復相關基因表達水平等，起到治療性效果，但未影響T細

5、胞亞型應答;5.以CRAMP經(jīng)腹腔給藥，下調了炎性細胞因子水平及炎性細胞的浸潤，但顯著增加Oxazolone誘導的小鼠體重損失與死亡;6.成功構建了基于HBcAg病毒樣顆粒的抗CRAMP疫苗，通過免疫小鼠獲得抗血清并經(jīng)尾靜脈注射對Oxazolone誘導的小鼠腸炎進行被動免疫干預以拮抗異常增高的內源性CRAMP，未發(fā)現(xiàn)顯著影響小鼠腸炎，提示CRAMP主要是通過影響腸上皮修復而非影響適應性T細胞炎癥免疫反應發(fā)揮作用。
　　本研究結果顯