工頻磁場(chǎng)誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的機(jī)制及其與細(xì)胞膜受體聚簇的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:研究工頻磁場(chǎng)誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的機(jī)制及其與表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)聚簇之間的關(guān)系。
　　方法:以人羊膜FL細(xì)胞為研究對(duì)象，將其暴露于0.4mT、50Hz的工頻磁場(chǎng)，采用活性氧試劑盒檢測(cè)工頻磁場(chǎng)暴露對(duì)細(xì)胞內(nèi)總活性氧水平的影響并確定其閾強(qiáng)度，利用化學(xué)發(fā)光法分析工頻磁場(chǎng)暴露對(duì)胞內(nèi)NADPH氧化酶活性的影響，采用線(xiàn)粒體ROS探針和胞漿ROS探針技術(shù)分析工頻磁場(chǎng)暴露對(duì)細(xì)胞線(xiàn)粒體和胞漿內(nèi)的ROS水平的影響，利用免疫化學(xué)熒光及激光

2、共聚焦顯微鏡技術(shù)分析NADPH氧化酶在工頻磁場(chǎng)誘導(dǎo)EGFR聚簇中的作用，運(yùn)用SAS9.1軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)、方差分析和SNK檢驗(yàn)并統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:研究結(jié)果顯示，0.4mT的工頻磁場(chǎng)暴露5min、15min和30min后，F(xiàn)L細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平均升高，且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;而暴露60min后，F(xiàn)L細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平與假暴露組無(wú)顯著差異（P＞0.05）。0.2mT的工頻磁場(chǎng)暴露15min也能誘導(dǎo)F

3、L細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平明顯升高（P＜0.05）;而0.1mT的工頻磁場(chǎng)暴露15min不能升高細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平（P＞0.05）。0.4mT的工頻磁場(chǎng)暴露15min和30min后，可誘導(dǎo)FL細(xì)胞線(xiàn)粒體內(nèi)ROS顯著升高（15min組P＜0.01，30min組P＜0.05），而暴露5min和60min后，線(xiàn)粒體內(nèi)ROS水平與假暴露組均無(wú)差異(P＞0.05);0.4mT的工頻磁場(chǎng)暴露5min、15min和30min后，同樣可誘導(dǎo)FL胞漿內(nèi)的R

4、OS水平升高，且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而暴露60min后，胞漿內(nèi)的ROS水平與假暴露組無(wú)差異（P＞0.05）。0.4mT的工頻磁場(chǎng)暴露5min、15min和30min后，F(xiàn)L細(xì)胞內(nèi)NADPH氧化酶的活性與假暴露組比較均升高（P＜0.05）;而暴露60min后，胞內(nèi)NADPH氧化酶活性與假暴露組無(wú)差異（P＞0.05）。經(jīng)NADPH氧化酶抑制劑DPI（1μM）預(yù)處理15min后，0.4mT工頻磁場(chǎng)暴露組細(xì)胞內(nèi)總活性氧水平和胞

5、漿內(nèi)的活性氧水平均比未經(jīng)DPI處理組低（P＜0.05），且與假暴露組相比均無(wú)差異;而0.4mT工頻磁場(chǎng)暴露15min和30min誘導(dǎo)的線(xiàn)粒體活性氧產(chǎn)生均不能被DPI（1μM）抑制（P＞0.05）。0.4mT工頻磁場(chǎng)暴露15min后，發(fā)生EGFR聚簇細(xì)胞的百分率顯著增加（P＜0.01）;而DPI（1μM）預(yù)處理15min后，可抑制工頻磁場(chǎng)誘導(dǎo)的細(xì)胞膜EGFR聚簇。
　　結(jié)論:
　　基于本研究的結(jié)果，可以獲得以下結(jié)論: