靶向抑制CLUT-1及PI3K-Akt信號通路提高喉癌放射敏感性體內研究.pdf

1、背景和目的:
　　喉癌是世界范圍內常見的頭頸部惡性腫瘤，適當的放射治療，代替或聯合手術、化療，可保留器官功能，提高患者生存質量，放射抵抗在很大程度上限制了放療應用。葡萄糖轉運蛋白-1(GLUT-1)的過度表達和PI3K/Akt信號通路的過度激活與喉癌放射抵抗之間存在密切關系，本文旨在探討通過反義寡核苷酸抑制GLUT-1表達以及特異性抑制PI3K/Akt信號通路對于喉癌Hep-2細胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用。
　　方法:

2、>　　采用喉癌Hep-2細胞懸液于裸鼠皮下接種法建立喉癌裸鼠移植瘤模型，隨機分為11組:對照組，GLUT-1 AS-ODN組(GLUT-1 AS-ODN)，Ly294002組，LY294002+GLUT-1 AS-ODN組，Wortmannin組，wortmannin+GLUT-1 AS-ODN組，10Gy組，LY294002+10Gy組， wortmannin+10Gy組，LY294002+GLUT-1AS-ODN+10Gy組，wor

3、tmannin+GLUT-1 AS-ODN+10Gy組，觀察并記錄各組移植瘤的體積、重量，計算抑瘤率、放射增敏比值(E/O)，采用實時RT-PCR、Westernblotting技術檢測各組移植瘤組織中GLUT-1、p-Akt、PI3K mRNA與蛋白的表達，Tunel檢測移植瘤組織細胞凋亡。
　　結果:
　　放射治療前反義GLUT-1、Wortmanin、反義GLUT-1+Ly294002、反義GLUT-1+Wortman

4、in能顯著下調GLUT-1、PI3K、p-Akt mRNA及蛋白的表達(p＜0.05)，促進喉癌細胞凋亡(p＜0.05)，抑制腫瘤的生長(p＜0.05)，而Ly294002表現出顯著的促凋亡作用，腫瘤生長受抑但無統(tǒng)計學差異。10GyX線照射后，Ly294002、Wortmanin、反義GLUT-1+Ly294002、反義GLUT-1+Wortmanin能顯著增強10Gy X線放射殺傷作用(p＜0.05)。Ly294002、Wortman

5、in、反義GLUT-1+Ly294002、反義GLUT-1+Wortmanin的抑瘤率分別為3.4％、53.4％、50.0％、43.5％，E/O值分別為2.7、1.8、1.1、1.8。
　　結論:
　　GLUT-1及PI3K/Akt信號通路的過度激活與喉癌放射抵抗相關，GLUT-1AS-ODN、LY294002、wortmannin能夠增加喉癌放射敏感性，其放射增敏效應是通過抑制GLUT-1、PI3K、p-Akt mRNA和