調理脾胃針法對糖尿病腎病患者淋巴細胞損傷修復機制的研究.pdf

1、目的：
　　觀察調理脾胃針法對于糖尿病腎病(Diabetic nephropathy, DN)患者淋巴細胞損傷的修復作用，并從基因層面初步探討其分子機制，以期為針刺防治DN提供有力依據(jù)。
　　方法：
　　以DN患者為研究對象，收集2014年1月至2015年1月就診于天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院的住院患者60例，按隨機數(shù)字表法分為觀察組、對照組各30例。兩組病人在基礎治療的前提下，觀察組施以調理脾胃針法，對照組按照傳統(tǒng)針刺

2、取穴，每日2次，6天為一療程，休息1天后，繼續(xù)第二個療程，共計4周。
　?。?）分別與治療前及治療4周后取血，并運用流式細胞技術觀察兩組患者血液內CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+含量，并從血液中提取淋巴細胞，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測淋巴細胞丙二醛(MDA)、羰基（PCO）、8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)含量，運用分光光度法檢測超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧物酶（GSH-PX）、過氧化氫酶（CAT）活性。

3、r>　　（2）選擇觀察組治療前后共8個淋巴細胞樣本，并用全基因組芯片檢測基因表達譜變化，并進行差異表達基因、本體論（GO）、信號通路分析。
　　結果：
　　1.兩組患者在性別、年齡、病程、體重指數(shù)、糖化血紅蛋白、收縮壓、舒張壓、血肌酐、尿白蛋白排泄率比較，差異均無顯著性意義(P>0.05)，說明2組之間具有齊同可比性。
　　2.兩組患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+治療前比較，差異無顯著性意義（P>0

4、.05)；而觀察組治療后CD4+、CD4+/CD8+比值較治療前明顯降低，差異有非常顯著性意義(P<0.01)，CD8+、CD3+較治療前明顯升高，差異有非常顯著性意義(P<0.01)；而對照組治療后CD8+、CD3+亦較治療前有明顯升高(P<0.01，P<0.05)，CD4+、CD4+/CD8+比值較治療前明顯降低(P<0.01)；兩組治療后比較，CD8+和CD4+/CD8+差異有顯著性意義(P<0.05)。說明兩種針法均可以調節(jié)T淋

5、巴細胞亞群數(shù)量，但是調理脾胃針法較傳統(tǒng)針刺法更有效。
　　3.兩組患者淋巴細胞8-OHdG、PCO、MDA、SOD、GSH-PX、CAT治療前比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；觀察組治療后MDA、8-OHdG較治療前降低，差異有非常顯著性意義(P<0.05，P<0.01)；SOD、GSH-PX、CAT較治療前升高，均有顯著性差異（P<0.05，P<0.01）；PCO無明顯變化（P>0.05）；而對照組治療后8-OHdG較治療

6、前降低，有顯著性差異（P<0.01），GSH-PX、CAT、SOD較治療前升高，比較有非常顯著性差異（P<0.05，P<0.01），MDA和PCO無明顯變化（P>0.05）；2組治療后比較，CAT差異有非常顯著性意義（P<0.01）。
　　4.觀察組治療前后之間差異基因數(shù)量為46條，其中表達上調的有18條，下調的有28條。68個GOs被上調的差異基因調節(jié)，159個GOs被下調的差異基因調節(jié)。上調的差異基因共調控5條信號通路，包括谷

7、胱甘肽代謝、細胞因子受體相互作用等；下調的差異基因共調控40條信號通路包括1型糖尿病、PPAR信號通路、TGF-β信號通路、HIF-1信號通路、T細胞受體信號通路、Jak-STAT信號通路、老年性癡呆、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。
　　結論：
　　DN患者存在淋巴細胞損傷，調理脾胃針法能夠增強自由基清除能力，降低DNA氧化損傷，調節(jié)T淋巴細胞亞群數(shù)量及活性異常，從而改善淋巴細胞免疫表達，修復淋巴細胞損傷，進而改善腎功能，延緩了腎損害。