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文檔簡介
1、目的:探討同種異體骨髓單個核細胞(bone marrow mononuclear cells,BMMNCs)移植入脊髓全橫斷損傷大鼠對損傷脊髓組織局部微環(huán)境中巢蛋白(nestin)和突觸素Ⅰ(Synapsin I)表達的影響及意義。
方法:100只清潔級Wistar大鼠(雌雄不限)隨機取96只分為三組:正常對照組32只:切除相應的椎板不損傷脊髓;模型組32只:建立脊髓全橫斷模型;細胞移植組32只:建立脊髓全橫斷模型后,給予骨髓
2、單個核細胞(BMMNCs)移植治療。各組大鼠分別于不同時間段(3d、1w、2w、4 w)利用免疫組織化學技術和RT-PCR檢測脊髓組織中nestin與Synapsin I的表達變化,利用MIAS-2000圖像處理系統(tǒng)分析觀察nestin和Synapsin I的陽性產(chǎn)物在脊髓的分布,并測量陽性產(chǎn)物的光密度值。采用SPSS21.0統(tǒng)計分析數(shù)據(jù),組間比較,方差齊者采用完全隨機設計資料的方差分析,樣本間的兩兩比較用q檢驗;方差不齊者用成組設計多
3、個樣本比較的秩和檢驗(Kruskal-Wallis法),樣本間兩兩比較的秩和檢驗(Nemenyi法);P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義,P<0.01為有顯著性統(tǒng)計學意義。
結果:⑴BBB評分顯示術后正常對照組在各時間點的BBB脊髓功能評分未見明顯變化,屬評分正常;細胞移植組和模型對照組都有恢復過程,其中細胞移植組較模型對照組的大鼠恢復較好,但均未達到正常組水平;術后4周時細胞移植組BBB評分較模型對照組增加顯著,差別有統(tǒng)計學意
4、義(P﹤0.05)。⑵免疫組織化學染色、RT-PCR及圖像處理系統(tǒng)分析顯示模型對照組在傷后約3d可見損傷區(qū)域附近nestin表達升高,2w達高峰,4w后nestin表達明顯下調(diào);細胞移植組在脊髓傷3d可見損傷區(qū)域附近nestin表達升高,1w達高峰,4w后nestin表達明顯下調(diào),且各時期與正常對照組、模型對照組相比較均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。細胞移植組與模型對照組Synapsin I在損傷3d后可見表達,1w、2w和4w的表達量
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