CUG-BP1在喉鱗狀細胞癌中的表達及臨床意義.pdf

1、目的:
　　本研究旨在探索喉鱗狀細胞癌中CUG-BP1的蛋白和RNA表達情況，表達部位及意義，旨在尋求喉癌早期診斷，基因靶向治療方法及預后評價的指標。
　　材料與方法:
　　一、實驗材料
　　實驗組:收集2011至2014年間在中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院耳鼻咽喉科手術治療的60例喉鱗狀細胞癌組織標本，對照組:選取其中25例行全喉手術標本中距腫瘤邊緣＞2cm黏膜組織作為對照組.
　　二、實驗方法
　　1、

2、Real Time-PCR方法測CUG-BP1蛋白的mRNA表達量.
　　TAKARA試劑盒法提取實驗組及對照組RNA，轉錄為cDNA后進行RealTime-PCR擴增。
　　2、免疫組化檢測CUG-BP1蛋白在實驗組及對照組中的表達情況及表達部位。
　　3、western blot方法檢測CUG-BP1蛋白的表達.
　　提取實驗組及對照組組織的總蛋白，應用SDS-PAGE凝膠電泳方法轉印CUG-BP1蛋白于PV

3、DF膜上， ECL發(fā)光后保存圖片，測定CUG-BP1蛋白的灰度值，分析CUG-BP1蛋白的表達情況。
　　結果:
　　1、本研究檢測了60例喉癌和25例喉正常黏膜的CUG-BP1mRNA水平。所有的腫瘤標本及正常黏膜中均有CUG-BP1表達，但其表達量存在差異。喉癌中CUG-BP1mRNA表達的相對值是6.56±1.10:癌旁＞2cm黏膜中CUG-BP1mRNA表達的相對值是2.68±0.55。喉癌中CUG-BP1的mRNA

4、表達水平是癌旁＞2cm黏膜的2.22-4.48倍;差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.001)。
　　2、本研究檢測了60例喉癌和25例正常黏膜的CUG-BP1蛋白表達，95％(57/60)的喉鱗狀細胞癌有CUG-BP1蛋白表達;52％(13/25)的喉黏膜細胞內存在CUG-BP1的蛋白表達，且CUG-BP1蛋白在喉癌中表達量高于癌旁黏膜。GAPDH蛋白在喉鱗癌和癌旁黏膜中表達水平相似。
　　3、本研究應用免疫組化的方法檢測CUG-B

5、P1蛋白的細胞內分布。喉癌組織中CUG-BP1蛋白主要定位于細胞核內，少量分布在細胞漿內。喉鱗狀細胞癌中CUG-BP1蛋白表達量明顯高于黏膜中CUG-BP1蛋白表達量。因此喉鱗狀細胞癌中的CUG-BP1蛋白表達量同癌旁黏膜的表達量存在差異。在陰性對照的切片中沒有觀察到免疫反應。
　　4、喉鱗狀細胞癌組織中CUG-BP1蛋白的表達與臨床分期、病理分級及淋巴結轉移存在相關性(P＜0.05)，而與患者的年齡、性別、腫瘤生長部位因素無相關

6、性(P＞0.05).
　　結論:
　　1、喉癌組織中存在CUG-BP1 mRNA和蛋白的表達。
　　2、喉癌組織中CUG-BP1 mRNA和蛋白表達水平高于對照黏膜組織，二者之間差異具有統(tǒng)計學意義。
　　3、CUG-BP1的蛋白在喉鱗狀細胞癌中表達量高于癌旁＞2cm的黏膜的表達量，且主要位于細胞核內。
　　4、CUG-BP1蛋白的表達同腫瘤的臨床分期，分化程度及腫瘤是否存在淋巴結轉移具有相關性，說明CUG-