兩種蟹奴形態(tài)學(xué)及分子標(biāo)記的初步研究.pdf

1、經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子標(biāo)記確認(rèn)，寄生在中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)的寄生蟲(chóng)為簇生蟹奴(Polyascus gregaria)，屬于有刺胞幼體亞目(Kentrogonida)，蟹奴科(Sacculinidae)。以納精囊和卵巢的發(fā)育過(guò)程為主要根據(jù)，將淡水中簇生蟹奴外體發(fā)育過(guò)程分為三個(gè)階段。簇生蟹奴納精囊內(nèi)部細(xì)胞隨著發(fā)育逐漸變得松散，中央出現(xiàn)內(nèi)面角質(zhì)化的空腔，發(fā)育至可以接納雄性幼蟲(chóng)的階段；簇生蟹奴卵巢在淡水中無(wú)法發(fā)育至成熟階段

2、，卵巢在發(fā)育中逐漸分層，卵原細(xì)胞發(fā)育成卵母細(xì)胞，只有極少數(shù)卵母細(xì)胞發(fā)育成為成熟卵細(xì)胞。在淡水環(huán)境中，簇生蟹奴無(wú)法達(dá)到成熟期，也不能傳播和擴(kuò)散。組織切片證實(shí)肝胰腺中含有大量簇生蟹奴內(nèi)體，內(nèi)體為細(xì)小管狀結(jié)構(gòu)，寄生會(huì)使寄主肝胰腺發(fā)生病變。在簇生蟹奴感染初期，感染蟹奴的病蟹肉眼難以辨別，因此本文利用簇生蟹奴I(xiàn)TS區(qū)域設(shè)計(jì)了一對(duì)特異性引物，建立了簇生蟹奴的PCR檢測(cè)方法，這對(duì)引物顯示了良好的物種特異性，最低檢出限為1.9pg。我們采用該方法對(duì)簇生

3、蟹奴內(nèi)體的分布進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)病蟹除心臟、步足最末兩節(jié)(掌節(jié)、指節(jié))外，其他主要組織如腹肌、胸肌、肝胰腺、性腺、鰓、步足底節(jié)至腕節(jié)肌肉均有內(nèi)體分布，這與之前認(rèn)為蟹奴內(nèi)體遍布全身各組織的看法有所不同。
　　 經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子標(biāo)記確認(rèn)，寄生于紅星梭子蟹(Portunus sanguinolentus)上的蟹奴為中華雙環(huán)粒蟹奴(Diplothylacus sinensis)，屬于無(wú)刺胞幼體亞目(Akentrogonida)，唐伯森科(T

4、hompsoniidae)。這是國(guó)內(nèi)首次報(bào)道發(fā)現(xiàn)中華雙環(huán)粒蟹奴寄生蟲(chóng)。其外體發(fā)育較為特別，分為雌性和雄性2種，本文對(duì)其兩性外體的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)特征和發(fā)育做了詳細(xì)描述，根據(jù)外套膜數(shù)量、外體大小、幼蟲(chóng)發(fā)育程度將其雌性外體發(fā)育過(guò)程分為七個(gè)階段，著重對(duì)幼蟲(chóng)在母體內(nèi)的發(fā)育過(guò)程進(jìn)行了研究。雄性外體分化中卵黃顆粒會(huì)逐漸減少，出現(xiàn)精子。中華雙環(huán)粒蟹奴外體由位于寄主體內(nèi)的內(nèi)體連接起來(lái)并通過(guò)內(nèi)體吸收寄主營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，內(nèi)體為網(wǎng)狀不規(guī)則分枝結(jié)構(gòu)，主要分布在寄主甲殼之下