藍莓花青素分析及抗氧化活性研究.pdf

1、花青素，是黃酮類化合物，是廣泛存在于植物中的天然水溶性色素，因主要以糖苷的形式存在，所以也稱花色苷?？蒲薪Y果顯示:花青素是現(xiàn)今所發(fā)現(xiàn)的最有效的天然水溶性自由基清除劑。隨著研究者對花青素更加深入的研究，其功效越來越引人矚目，花青素的主要的功效有:①延緩衰老、激活巨噬細胞，使血清免疫球蛋白免受自由基的侵害;②提高免疫力、降低心腦血管疾病的發(fā)病率;③降低糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)病機率、改善退行型老年癡呆、保護基因的完整性;④降低癌癥的發(fā)病率、抗發(fā)

2、炎、預防視力衰退等諸多功能。
　　藍莓在我國已實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化栽培，全國有近5萬畝的栽培面積，其中遼南地區(qū)栽培面積近1萬畝;未來幾年，藍莓果將進入豐產(chǎn)期，藍莓鮮果40％產(chǎn)量作為鮮果食用，60％的藍莓果需要進行深加工。目前，市場上的藍莓果產(chǎn)品質量良莠不齊，沒有地方和行業(yè)標準，以藍莓花青素作為藍莓果加工產(chǎn)品的質量和評價標準的建立迫在眉睫。藍莓花青素目前的研究主要集中在分離、純化及結構鑒定上。本論文基于前期開展的花青素高效液相色譜檢測分析，針

3、對遼南地區(qū)主要栽培品種進行花青素成分及含量分析，同時，對藍莓花青素提取物進行清除自由基活性評價，并在細胞水平上考察抗氧化活性，建立藍莓果及產(chǎn)品質量及評價標準，得到如下結論:
　　(1)不同藍莓品種花青素的含量測定
　　選擇黑珍珠、北青、伯克利、藍豐4個藍莓品種，對其鮮果進行高效液相色譜分析，發(fā)現(xiàn)藍莓果中主要花青素有13種，這13種花青素在黑珍珠、伯克利、北青、藍豐中占總花青素的比例分別達到了89.63％、99.32％、99.

4、04％、98.26％。以這13種花青素作為藍莓花青素的指紋組分，作為藍莓花青素定性、定量分析的評價標準;以矢車菊色素為標準品，測定黑珍珠、北青、伯克利、藍豐品種果汁花青素，含量分別為8.25、3.35、2.83、2.63mg/g。實驗室制備藍莓花青素提取物樣品的花青素含量為30.45％。
　　(2)藍莓花青素清除自由基活性
　　以維生素C(VC)、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)為對照，以DPPH自由基、ABTS自由

5、基、超氧陰離子、羥自由基的清除能力、總抗氧化活性和還原力、對脂質過氧化的抑制能力為指標，分別考察藍莓花青素提取物的清除自由基能力;實驗證明，除對脂質過氧化的抑制能力外，藍莓花青素提取物（花青素含量為30.45％）清除自由基能力與花青素含量成正比，對DPPH自由基、超氧陰離子、羥自由基的清除能力、總抗氧化能力、總還原力，單位質量活性花青素均強于VC，對ABTS自由基清除能力單位質量活性花青素與VC相當。對脂質過氧化的抑制能力，脂溶性BHT

6、強于藍莓花青素和VC。黑珍珠、北青、伯克利、藍豐4個品種藍莓花青素含量與DPPH清除自由基能力呈正相關。
　　(3)藍莓花青素細胞水平抗氧化活性
　　以BGC-823為對象，通過H2O2添加造成細胞氧化損傷，分別考察藍莓花青素提取物、VC和BHT對損傷細胞的保護和恢復作用，實驗表明藍莓花青素提取物的保護作用明顯，并且具有劑量依賴性。藍莓花青素提取物、VC和BHT對H2O2損傷后的細胞均沒有恢復作用。添加H2O2誘導BGC-8

7、23細胞ROS增加，而藍莓花青素的添加可抑制ROS的生成，且有劑量正相關性;同時，可提高細胞內谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶活性，清除氧自由基。
　　綜上，論文研究確定了13種花青素作為藍莓花青素指紋鑒定組分，用于HPLC的定性與定量分析。藍莓花青素清除自由基能力與含量成正比，對DPPH自由基、超氧陰離子、羥自由基的清除能力、總抗氧化能力、總還原力，單位質量活性花青素優(yōu)于VC，而對ABTS自由基清除能力與VC相當。藍莓花青素在細胞