光刻法及激光誘導法制作細胞微圖案.pdf

1、細胞微圖型化技術是一個多學科高度交叉的領域，它在許多方面有著重要的潛在應用：第一，可應用于大規(guī)模的藥物發(fā)現與篩選；第二，是細胞傳感器上用于固定細胞的一個重要手段；第三，是組織工程學的研究基礎；第四，為分子細胞基礎生物學的研究提供另外一種方法。構建細胞微圖案也是我課題組進行細胞相關研究的基礎。 目前已經發(fā)展了許多種細胞微圖案的制作方法。主要有光刻法、軟光刻法(包括微印章技術及微流體技術)、“墨水”噴印技術、模板輔助圖案技術、激光誘

2、導直寫技術、電化學圖案化技術等。這些方法各有各的優(yōu)缺點，但它們的制作均較為復雜，操作較為困難。 本論文主要是運用光刻法及二氧化碳激光誘導法制作細胞微圖案，主要的研究內容及獲得的結果如下： 1.建立了以光刻法為基礎的細胞微圖案技術，得到了蛋白質微陣列及初步的細胞差異化圖案。 2.利用四氫鋁鋰對PMMA表面進行化學活化，活化后的表面可以進一步修飾各種分子基團，從而提高PMMA表面的可修飾性及細胞可貼附性。并用HeLa

3、細胞進行了驗證。 3.利用具有強氧化性的溴水誘導牛血清白蛋白變性，驗證了牛血清白蛋白可抑制動物細胞的非特異性粘附，而牛血清白蛋白變性后的表面則可進行細胞粘附。 4.提出并建立了以二氧化碳激光誘導蛋白質變性為基礎制作細胞微圖案技術。利用二氧化碳激光誘導自組裝在基底上的牛血清白蛋白變性，得到了變性/非變性的牛血清白蛋白微圖案，進一步接種上HeLa細胞后可得到細胞微圖案。此法可以實現快速簡便地制作復雜的細胞微圖案。若使用較小激