不同地理種源的麻瘋樹ISSR分析.pdf

1、福建師范大學碩士學位論文不同地理種源的麻瘋樹ISSR分析姓名：黃勇申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學及分子生物學指導教師：黃儒珠20070901摘要應用ISSR標記技術對來自云南、四川、廣西、貴州和海南5個省區(qū)的32個麻瘋樹種源的遺傳多樣性和親緣關系進行分析，比較不同地理種源麻瘋樹的遺傳差異，為麻瘋樹的良種選育以及種質(zhì)資源保護提供實驗依據(jù)。研究結(jié)果如下：1設計了4種改良CTAB法和1種改良SDS法，用于從麻瘋樹嫩葉中提取DNA。通過比較實

2、驗，從5種改良方法中，篩選并建立了適合于麻瘋樹DNA提取的改良CTAB法III。用該法提取的麻瘋樹DNA質(zhì)量完全能滿足ISSR分析的要求。2通過對影響ISSRPCR擴增的模板DNA、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶以及M蛇濃度等5因素(不同水平)的優(yōu)化實驗，建立了適合于麻風樹ISSRPCR擴增的體系：模板DNA300ng／251aL、dNTP015InmoI／L、引物020gmol／L、TaqDNA聚合酶1OU／251tL及M9230

3、mmol／L，反應體積25此；與之相適應的擴增程序為：94℃預變性3min；94℃變性1min，55℃退火15min，72℃延伸15min，循環(huán)46次；最后在72℃延伸5min。3從96個ISSR引物中篩選得到21個引物，用于32個麻瘋樹種源的ISSR分析。21個引物共檢測到21Q釜芷增條帶，其中多態(tài)性條帶占962％。表明32個不同地理種源麻風樹具有豐富的遺傳多樣性?；贗SSR擴增條帶數(shù)據(jù)建立了Jaeeard遺傳距離矩陣和聚類圖。32

4、個不同地理種源麻瘋樹間的遺傳距離值為0108104227，均值為02212。其中來自海南臨高的種源與海南白沙的種源遺傳距離最大，來自云南元陽城關的種源與云南元陽烏灣的種源遺傳距離最小：32個不同地理種源麻瘋樹的聚類結(jié)果表明，云南的8個種源和四川的5個種源，以及貴州(除貴州冊享的種源外)的7個種源，基本按地理來源各聚為一枝，表明其各自呈現(xiàn)與地理位置相對應較近的親緣關系。而來自廣西的8個種源，海南的3個種源，以及貴州冊享的種源則與地理來源的