尿嘧啶DNA糖苷酶2(UNG2)增強HepG2細胞抗氧化功能與機制.pdf

1、腫瘤代謝的特征是有氧糖酵解和活性氧（ROS）增高。腫瘤細胞常處于高氧化應激即高ROS的環(huán)境中，在高ROS的環(huán)境中核酸易發(fā)生突變產生異常堿基，造成遺傳信息的不穩(wěn)定。堿基切除修復在DNA堿基突變或損傷修復中扮演重要角色，尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG)是完成堿基切除修復的DNA修復酶。因此，UNG對處于高氧化環(huán)境中腫瘤細胞的細胞的生存至關重要。UNG表達過程中具有兩種剪切形式：UNG1和UNG2。UNG1主要表達于線粒體中，UNG2主要表達于細

2、胞核中。已有研究表明UNG1能夠在氧化環(huán)境中與過氧化物還原蛋白3(PRDX3)相互作用。這表明在高氧化應激環(huán)境中尿嘧啶糖苷酶參與了細胞內氧化還原平衡的調控。因此，對于肝細胞癌細胞這類細胞內氧化應激水平異常的細胞，UNG基因對于其正常生存可能發(fā)揮關鍵的作用?；诖?，探索UNG在肝細胞癌中的表達及功能對于了解肝細胞癌細胞的抗氧化生存機制以及尋找新的肝細胞癌治療靶標都具有積極的意義。
　　本研究首先檢測了UNG2在肝細胞癌中的表達情況。

3、結果發(fā)現(xiàn)UNG2在肝細胞癌組織中的表達明顯高于正常肝組織，并且UNG2在HepG2、Hep3B、7402、Huh7肝細胞癌細胞中的表達水平明顯高于正常肝細胞中的表達水平。免疫熒光染色實驗發(fā)現(xiàn)UNG2主要定位于HEK293T細胞的細胞核中。同時UNG2具有特異性的尿嘧啶糖苷酶活性。利用H2O2損傷模型，研究了UNG2對HepG2肝細胞癌細胞抗氧化功能的影響。超氧化物陰離子熒光探針二氫乙啶（dihydroethidium，DHE）染色結果發(fā)

4、現(xiàn)，100μmol/L的H2O2可以顯著提高HepG2細胞中的ROS水平。碘化丙啶（PI）染色結果顯示，高濃度H2O2處理引起HepG2細胞死亡。而過表達UNG2可以明顯提高HepG2在H2O2中的活性，同時過表達HepG2細胞在高濃度H2O2中的死亡比例明顯減少。同時數(shù)據顯示UNG2可以調控P53、Bax、caspase-3和Bcl-2等凋亡相關基因的表達，并提高HepG2細胞對雷帕霉素的敏感性。本研究證明了UNG2對肝細胞癌細胞的抗