白介素-37抗對乙酰氨基酚誘導小鼠肝損傷的作用研究.pdf

1、目的:通過建立對乙酰氨基酚誘導小鼠急性肝損傷的動物模型，初步探索白介素-37在肝損傷中的抗炎作用。
　　方法:將雄性昆明小鼠隨機分成4組(n=16)，即正常對照組（對照組）、對乙酰氨基酚肝損傷模型組（模型組）、IL-37干預組（預防組）、IL-37組，每組又按動物處死的時間點(12h，24h)隨機分為2小組。對照組:生理鹽水腹腔注射，2小時后腹腔注射PBS溶液;模型組:生理鹽水腹腔注射，2小時后腹腔注射對乙酰氨基酚250mg/kg

2、;預防組:IL-37b溶液1ug/只腹腔注射，2小時后腹腔注射等量的對乙酰氨基酚溶液;IL-37組:腹腔注射等量IL-37b溶液，2小時后腹腔注射PBS液。分別于12h及24h摘眼球取血后行頸椎脫臼法處死小鼠取出完整肝組織。行以下檢測:(1)采用賴氏法檢測小鼠血清中的ALT及AST水平;(2)采用ELISA法檢測小鼠血清中的IL-1β，IL-6，TNF-α表達水平;(3)用電子天平稱取肝臟重量，并計算出小鼠肝指數(shù);(4)通過HE染色觀察

3、小鼠肝組織病理改變;(5)通過免疫組化的方法檢測肝組織TNF-α、iNOS蛋白的表達。
　　結果:(1)對小鼠ALT及AST的影響:模型組ALT水平(12h、24h)較對照組顯著升高（P＜0.01），而AST只有24h較對照組顯著升高(P＜0.01)，但模型組24h的ALT及AST較12h的都升高(P＜0.05);預防組ATL水平(12h、24h)與模型組相比顯著降低(P＜0.01)，而AST只有24h較模型組顯著降低(P＜0.0

4、1);IL-37組ALT及AST(12h，24h)與對照組相比無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），且24h與12h相比無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。(2)對小鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α影響:與對照組相比，模型組12h及24h血清中的IL-1β、IL-6和TNF-α水平有升高(P＜0.05)，模型組24h的IL-1β、IL-6的水平較12h的顯著升高(P＜0.01);預防組12h和24h的IL-1β、IL-6、TNF-α水平較對照組

5、有升高(P＜0.05);IL-37組與對照組相比IL-1β、IL-6和TNF-α均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，且24h與12h相比無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。與模型組相比，預防組的12h及24h的IL-1β、IL-6和TNF-αL水平顯著降低(P＜0.01)。(3)小鼠肝指數(shù)的比較:與對照組相比，模型組12h及24h的肝指數(shù)顯著升高(P＜0.01)，且模型組12h與24h相比有升高(P＜0.05);IL-37組與對照組比較肝指數(shù)無統(tǒng)

6、計學差異（P＞0.05），且24h與12h相比無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);與模型組比較，預防組肝指數(shù)顯著降低(P＜0.01);(4)肝組織TNF-α、iNOS的比較:與對照組相比:模型組12h及24h的iNOS、TNF-α蛋白的表達顯著升高(P＜0.01)，預防組與對照組相比有升高(P＜0.05)，IL-37組與對照組比無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，與模型組相比:預防組iNOS、TNF-α蛋白的表達顯著減少(P＜0.01)。模型組iN

7、OS量24h與12h相比顯著升高(P＜0.05)，而TNF-α含量12h表達與24h相比有升高(P＜0.05)。
　　結論:(1)成功的構建了對乙酰氨基酚肝損傷的動物模型，并應用IL-37干預了小鼠的肝損害。(2)模型組小鼠血清中的ALT、AST、IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高，IL-37可降低上述指標的表達水平。(3)模型組肝指數(shù)升高，肝損傷程度加重，肝組織TNF-α、iNOS蛋白表達升高，IL-37可改善組織學及降低