大鼠心肌缺血后適應(yīng)與心肌Toll樣受體2,4的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：大多數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家和一些發(fā)展中國(guó)家，其缺血性心臟病的發(fā)病率和病死率日益增加，位于前列。突發(fā)的心肌缺血事件時(shí)，盡快的再灌注治療是尤為重要的，但在實(shí)際臨床中，再灌注損傷是難以避免的，且造成嚴(yán)重的后期損害。因此充分認(rèn)識(shí)心肌缺血再灌注損傷（MIRI）的發(fā)生機(jī)制，探尋安全有效的治療手段減輕再灌注損傷是目前迫切需要和解決的難題。國(guó)內(nèi)外很多研究發(fā)現(xiàn)心肌缺血后適應(yīng)（ischemic postconditioning,IPOC）及Toll樣受體（Tol

2、l like receptor，TLR）在心肌缺血再灌注損傷中起重要作用，所以本課題探討TLR-2、TLR-4與MIRI及IPOC相關(guān)性,為深入研究MIRI及IPOC的機(jī)制和尋求有效的治療方法提供理論依據(jù)。
　　方法：選取體重相似的Wistar雄性大鼠24只，腹腔內(nèi)注射3％水合氯醛(10mL/kg)麻醉，將大鼠置于解剖臺(tái)上，仰臥位固定，記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖。連接動(dòng)物呼吸機(jī)，開(kāi)胸暴露心臟，剪開(kāi)心包膜，在左心耳下緣、肺動(dòng)脈圓錐左緣之間穿刺

3、進(jìn)針，圍繞左冠狀動(dòng)脈前降支上1／3處穿入7-0無(wú)損傷縫線，心肌缺血時(shí)收緊結(jié)扎線，再灌注時(shí)牽拉放松絲線。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，分別造模為假手術(shù)組（S）、心肌缺血/再灌注組（I/R）、心肌缺血預(yù)適應(yīng)組（IPC）、心肌缺血后適應(yīng)組（IPOC）。建模成功后處死大鼠，取出心臟，鹽水沖洗，剔除脂肪，血管等組織，并沿冠狀溝切除心房，右心室，僅留下左心室肌，置于液氮1小時(shí)后存于-80度冰箱中，待以后研磨提取RNA及PCR，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-

4、PCR）檢測(cè)心肌組織TLR2及TLR4mRNA水平。
　　結(jié)果：各實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌細(xì)胞中TLR2mRNA、TLR4mRNA的表達(dá)情況，（1）IPOC組、IPC組及I/R組的TLR2mRNA、TLR4mRNA的表達(dá)均大于假手術(shù)組（P＜0．05)；（2）IPOC組和IPC組的TLR2mRNA、TLR4mRNA的表達(dá)均少于I/R組(P＜0．05);(3)IPOC組與IPC組的心肌細(xì)胞TLR2mRNA、TLR4mRNA表達(dá)則無(wú)顯著差異，P＞