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文檔簡介
1、血管內皮生長因子VEGF(Vascular Endothelial Growth Factor)是一類與肝素結合的生長因子,對血管內皮細胞具特異的致分裂作用,可促使內皮細胞分裂增殖.Flt-1基因全長7680bp,編碼區(qū)為4014bp,編碼1338個氨基酸.Flt-1由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內區(qū)組成.從人臍靜脈內皮細胞中提取得到總RNA,以其為模板,通過RT-PCR擴增獲得編碼Flt-1胞外1~4結構域的基因片段sFlt-1 cDNA,將s
2、Flt-1 cDNA片斷克隆至pUC18載體進行測序.首先在鏈霉菌中進行了sFlt-1的克隆表達.收集不同時間重組菌的發(fā)酵上清進行胞外分泌研究.本文是sFlt-1在鏈霉素菌中進行外泌表達的首次報道.將sFlt-1基因片段插入甲醇酵母-大腸桿菌穿梭質粒pPIC9K,構建了重組質粒pPIC9K-F,將重組質粒轉化到甲醇酵母Pichia pastoris GS115中,得到兩種表型的重組菌株P.pastoris[pPIC9K-F].對其表達上
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