貓兒屎內(nèi)生真菌DL06次生代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、植物資源作為天然藥物的重要來(lái)源之一，長(zhǎng)期受到了人們的開(kāi)發(fā)與利用。但隨著植物資源保護(hù)及其可持續(xù)發(fā)展意識(shí)的逐漸增強(qiáng)，尋找新的藥物資源來(lái)緩解植物資源已成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。內(nèi)生真菌在植物體內(nèi)普遍存在，近年來(lái)，通過(guò)對(duì)植物內(nèi)生真菌的大量研究，從這一資源中得到一系列次生代謝產(chǎn)物，且大多具有抗菌、殺蟲(chóng)、抗癌等生物活性。因此，植物內(nèi)生真菌為天然藥物提供了豐富的資源。貓兒屎是我國(guó)傳統(tǒng)民間中草藥，本課題對(duì)分離自貓兒屎植物葉中一株具有較強(qiáng)抑菌活性的真菌DL06

2、進(jìn)行了研究。
　　經(jīng)形態(tài)學(xué)特征和ITS序列分析將菌株DL06鑒定為產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysogenum)。對(duì)菌株DL06采用大米培養(yǎng)基進(jìn)行固體發(fā)酵，將發(fā)酵產(chǎn)物陰干粉碎，先后用石油醚、乙酸乙酯、甲醇進(jìn)行提取，濃縮后分別得到石油醚相90g、乙酸乙酯相150g、甲醇相300g的粗浸膏。應(yīng)用多種層析手段和重結(jié)晶等方法對(duì)粗浸膏進(jìn)行分離純化，并得到了15個(gè)化合物，結(jié)合理化性質(zhì)和波譜分析確定為:β-谷甾醇(1)、6，8-二羥基

3、-3-甲基異香豆素(2)、單甲基硫赭曲菌素(3)、大黃素-8-甲醚(4)、2-乙?；?4(3H)-喹唑啉酮(5)、煙酸(6)、meleagrin(7)、富馬酰-L-丙氨酸(8)、2-呋喃甲酸(9)、5-羥甲基呋喃-3-羧酸(10)、丁二酸(11)、6-檸檬酸甲酯(12)、赤蘚醇(13)、甘露醇(14)、胡蘿卜苷(15)。其中，化合物2、3、9、10都是首次從產(chǎn)黃青霉菌的發(fā)酵物中得到。
　　采用DPPH法對(duì)化合物6，8-二羥基-3-

4、甲基異香豆素(2)、單甲基硫赭曲菌素(3)、大黃素-8-甲醚(4)、meleagrin(7)、富馬酰-L-丙氨酸(8)、5-羥甲基呋喃-3-羧酸(10)的抗氧活性進(jìn)行了測(cè)試，結(jié)果顯示化合物8具有一定的抗氧化活性，其他化合物均不表現(xiàn)出明顯的抗氧化活性。以4株細(xì)菌（金黃色葡萄球菌，乳鏈球菌，大腸桿菌，綠膿桿菌）和10株植物病原真菌（蘋果樹(shù)腐爛病菌，油菜菌核病菌，葡萄炭疽病菌，小麥赤霉病菌，白菜黑斑病菌，番茄灰霉病菌，辣椒疫霉病菌，芍藥炭疽病

5、菌，玉米大斑病菌，煙草赤星病菌）作為測(cè)試菌，對(duì)分離到的15個(gè)化合物進(jìn)行抑菌活性測(cè)試，結(jié)果表明化合物2、3對(duì)細(xì)菌和真菌均表現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制作用，化合物4、5、7、8對(duì)大部分測(cè)試菌具有較好的抑制作用，化合物9對(duì)芍藥炭疽病菌和玉米大斑病菌具有較好的抑制作用，化合物10對(duì)細(xì)菌表現(xiàn)出較好的抑制作用。
　　本課題從貓兒屎內(nèi)生真菌DL06發(fā)酵產(chǎn)物中分離到15個(gè)單體化合物，分屬為甾類、異香豆素類、酮類、醌類、生物堿類和有機(jī)酸類等類。通過(guò)抑菌活性測(cè)試