楊樹(shù)創(chuàng)傷可誘導(dǎo)基因在擬南芥中的過(guò)量表達(dá)及抗蟲(chóng)效果.pdf

1、作為自然防御體系的重要組成部分，蛋白酶抑制劑是抗蟲(chóng)基因工程的重要候選基因。楊樹(shù)是木本模式植物，作為多年生植物，它在進(jìn)化過(guò)程中形成了非常完善和有效的防御體系。楊樹(shù)中有一系列能夠被機(jī)械損傷或者蟲(chóng)害誘導(dǎo)的基因，它們被認(rèn)為是潛在的具有抗蟲(chóng)能力的基因。我們選擇了四個(gè)創(chuàng)傷可誘導(dǎo)基因（兩個(gè)基因來(lái)自KTI家族，其中PtdKTI5來(lái)自雜交楊Populustrichocarpa×P.deltoides，PtKTI2來(lái)自白楊Populustremuloide

2、sMichx.，脅迫蛋白PtdPOP3和能夠在莖和葉中被誘導(dǎo)表達(dá)的PtdWIN4來(lái)自雜交楊Populustrichocarpa×P.deltoides）檢測(cè)其抗蟲(chóng)方面的能力。我們使用花絮浸泡法使四種基因由CaMV35S啟動(dòng)子控制,分別在擬南芥過(guò)量表達(dá)。目的基因的整合通過(guò)基因組PCR驗(yàn)證,轉(zhuǎn)錄水平通過(guò)qRT-PCR技術(shù)分析，并且通過(guò)T3后代篩選的方法得到了純合體植株。在抗蟲(chóng)試驗(yàn)中，對(duì)每種轉(zhuǎn)基因擬南芥類(lèi)型,選取三個(gè)獨(dú)立的、具有最高表達(dá)量的轉(zhuǎn)