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文檔簡介
1、目的:觀察高糖培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)血管生成調控因子促血管生成素-2(Ang-2)、色素上皮衍生因子(PEDF)和血管內皮生長因子(VEGF)的表達變化,探討外源性給予促血管生成素-1(Ang-1)對這些血管生成調控因子的影響。
方法:將HUVECs隨機分為正常組(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖組(30mmol/L葡萄糖)、甘露醇組(5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇)、Ang-1組(30
2、mmol/L葡萄糖+250ng/mlAng-1)。加入不同的處理因素,培養(yǎng)24h和48h后,采用細胞免疫組化、細胞免疫熒光和實時熒光定量聚合酶鏈反應(real-timePCR)方法,檢測Ang-2、PEDF和VEGF蛋白及mRNA表達水平。
結果:(1)Ang-2主要表達于HUVECs的胞漿和(或)胞膜。正常組和甘露醇組Ang-2蛋白和mRNA表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05);高糖組和Ang-1組Ang-2蛋白和mRNA表
3、達較正常組隨時間上調,僅高糖組48h上調明顯(P<0.05);48hAng-1組Ang-2蛋白和mRNA表達低于同時點高糖組(P<0.05)。
(2)PEDF主要表達于HUVECs的胞漿和(或)胞膜。正常組和甘露醇組PEDF蛋白和mRNA表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05);高糖組和Ang-1組PEDF蛋白和mRNA表達低于正常組(P<0.05),并隨時間有下調趨勢,高糖組48h下調明顯(與同組24h比較,P<0.05);An
4、g-1組PEDF蛋白和mRNA表達較同時點高糖組上調,但無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
(3)VEGF主要表達于HUVECs的胞漿和(或)胞膜。正常組和甘露醇組VEGF蛋白和mRNA表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05);高糖組和Ang-1組VEGF蛋白和mRNA表達高于正常組(P<0.05),并隨時間有上調趨勢,高糖組48h上調明顯(與同組24h比較,P<0.05);Ang-1組VEGF蛋白和mRNA表達較同時點高糖組下調,但
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