乙型肝炎病毒X蛋白與翻譯延長(zhǎng)因子1α1(eEF1α1)的相互作用及對(duì)其功能的影響.pdf

1、持續(xù)的乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染可引起急慢性乙型肝炎，肝硬化,并與原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC）的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。全球有超過(guò)3億的慢性感染人口，HBV 致病的確切分子病理機(jī)制仍不清楚。
　　 HBV為一種部分雙鏈環(huán)狀嗜肝DNA 病毒，含4個(gè)編碼病毒蛋白的開(kāi)放讀碼框（ORF），其中一個(gè)X基因ORF 編碼HBV X蛋白（HBx），包含了154個(gè)氨基酸。HBx 被認(rèn)為是一個(gè)多功能蛋白，在病毒的感染、宿

2、主細(xì)胞的凋亡、肝癌的發(fā)生以及參與病毒與宿主細(xì)胞相互作用的過(guò)程中都起到十分重要的作用。HBx在參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中所發(fā)揮的影響是當(dāng)前HBV 研究的熱點(diǎn)。目前的研究表明，HBx的許多生物學(xué)功能需通過(guò)與其它的蛋白相互作用完成，HBx蛋白可以和許多的細(xì)胞因子相互作用，其中包括轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)因子以及凋亡相關(guān)的蛋白。
　　 鑒于已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了種類繁多的HBx 結(jié)合蛋白，我們認(rèn)為可能還存在一些目前未知的能夠和HBx蛋白相互作用的細(xì)

3、胞蛋白。為更深入研究HBx的功能，本課題第一部分，我們運(yùn)用免疫沉淀（Immunoprecipitation）及隨后的基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定（MALDI-TOF-MS）的方法篩選獲得了五個(gè)HBx 相互作用的肝細(xì)胞蛋白，其中一個(gè)為真核延長(zhǎng)因子1a1（Eukaryotic Elongation Factor1alpha 1，eEF1a1）。eEF1a1又稱為真核細(xì)胞翻譯延長(zhǎng)因子1a1，是一個(gè)重要的蛋白翻譯因子。eEF1a-GTP

4、 催化氨酰tRNA 結(jié)合到核糖體的A 位點(diǎn)。eEF1a1不僅是翻譯必須的蛋白，而且是一個(gè)重要的多功能蛋白，參與許多重要的細(xì)胞過(guò)程和疾病，包括信號(hào)傳導(dǎo)、翻譯控制、凋亡、細(xì)胞骨架組成、病毒復(fù)制及癌基因轉(zhuǎn)化等。本課題的第二部分，通過(guò)GST pull-down 實(shí)驗(yàn)和免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步證實(shí)HBx蛋白與eEF1a1在細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)存在相互作用。
　　 eEF1a1的功能包括參