舒洛地特對阿霉素腎病大鼠足細胞podocalyxin、podocin、WT1表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察阿霉素腎病大鼠足細胞podocalyxin、podocin、WT1表達變化,比較潑尼松、舒洛地特、潑尼松+舒洛地特對阿霉素大鼠podocalyxin、podocin、WT1表達變化的影響,為人類臨床治療腎病綜合征尋找新方法提供實驗性理論依據(jù)。
  方法:清潔級健康雄性10周齡SD大鼠,共60只,隨機選取48只一次性尾靜脈注射阿霉素(6.5mg/kg)方法制備阿霉素腎病模型,其余12只大鼠等容量尾靜脈注射生理鹽水,作為對照

2、組(A組)。將造模成功的48只阿霉素。腎病大鼠隨機分為模型組(B組)、潑尼松干預組(C組)、舒洛地特干預組(D組)、潑尼松+舒洛地特干預組(E組),成模后即開始灌胃干預,C組給予潑尼松7.5mg/kg/d,D組給予舒洛地特10mg/kg/d,E組給予潑尼松7.5mg/kg/d+舒洛地特10mg/kg/d,A組、B組每天給予等量的生理鹽水灌胃。整個實驗期間大鼠自由飲食,不使用其他藥物。實驗開始后分別于藥物干預后4、8周末留取血及腎組織標本

3、,前一天開始留取24小時尿。檢測24小時尿蛋白、血清白蛋白(ALb)、尿素氮(BUN)、血清肌酐(Cr)、總膽固醇(TC)、總甘油三酯(TG)等指標;腎組織石蠟切片行免疫組化染色;提取腎皮質(zhì)總RNA行RT-PCR檢測podocalyxin、podocin、WT1表達情況;于8周末留取大鼠腎皮質(zhì)行電鏡觀察腎小球超微結(jié)構(gòu)病變。組間差異性比較采用單因素方差分析或Tamhane’s檢驗,結(jié)果用均數(shù)±標準差(x-±s)表示,顯著性水平等于0.05

4、,應用SPSS13.0軟件包對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理。
  結(jié)果:1尾靜脈注射阿霉素2周后,大鼠出現(xiàn)明顯水腫,測定24小時尿蛋白定量顯著增加,提示造模成功。應用藥物干預后4周末C、D、E組大鼠尿蛋白定量、總膽固醇、總甘油三酯較B組顯著降低(P<0.05),而白蛋白顯著增高,其中E組變化最為明顯;8周末C、D、E組大鼠仍有較高的尿蛋白排泄、高脂血癥及低蛋白血癥,但明顯輕于B組,其中E、D組與C組比較總膽固醇、總甘油三酯改善明顯,而E

5、、D兩組之間差異無顯著性(P>0.05)。應用藥物干預后4周末,各組大鼠血肌酐、尿素氮無明顯統(tǒng)計學差異,8周末B組大鼠血肌酐、尿素氮升高,而其余各組之間無明顯區(qū)別。
  2模型組大鼠電鏡表現(xiàn)為足細胞足突融合、腎小球基底膜厚薄不均,內(nèi)皮細胞腫脹。C、D、E組大鼠足細胞足突融合、病變程度較B組輕。E組大鼠足細胞足突輕度融合,腎小球基底膜較均勻,內(nèi)皮細胞輕度腫脹,而E組病變更輕。
  3免疫組織化學結(jié)果顯示藥物干預后4周末B、C、

6、D、E組大鼠腎組織中podocalyxin、podocin表達與A組相比均減低(P<0.05),而各治療組與B組相比,有所恢復,E組恢復最明顯。藥物干預8周末B、C、D、E組大鼠腎組織中podocalyxin、podocin表達仍較正常組低(P<0.05),但C、D、E組較B組表達有所恢復,E組恢復最明顯。
  4 RT-PCR結(jié)果顯示藥物干預后4周末B、C、D、E組大鼠腎組織中podocalyxin、podocin、WT1 mR

7、NA表達水平與A組相比均減低(P<0.05),B組減低更為明顯,而各治療組與B組相比,有所恢復。藥物干預8周末B、C、D、E組大鼠腎組織中podocalyxin、podocin表達仍較正常組低(P<0.05),但C、D、E組較B組表達有所恢復,E組恢復最明顯。
  結(jié)論:1在阿霉素腎病大鼠模型中,podocalyxin、podocin、WT1在足細胞表達下調(diào),與足突融合程度及蛋白尿、腎功能受損程度一致,提示podocalyxin、

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