川芎嗪對早期糖尿病腎病治療作用.pdf

1、本研究首先制備單腎糖尿病SD大鼠模型，將其分為6組：對照組（control）、模型組(model)、川芎嗪低劑量組15mg/kg（TMP15）、中劑量組30mg/kg(TMP30)、高劑量組60mg/kg(TMP60)及厄貝沙坦80mg/kg陽性對照組(IRB80)，檢測血糖、尿蛋白定量后篩選合格的糖尿病大鼠每組12只分別給予灌胃治療8和12周，分別在0、4、8、12周時進行尿量、飲水量、血糖、血常規(guī)及腎功能檢測，第8周和12周時每組分

2、別剖殺6只取腎臟組織進行腎重比（KW/BW）、腎臟病理學、免疫組化學及western blot蛋白檢測，探索川芎嗪對早期糖尿病腎病的治療作用。觀察在第8和12周時體重、KW/BW其余各組較 control均有下降， model\TMP15\TMP60組與 control組比較具有顯著差異性（P<0.05），TMP30和IRB80組和control組無統(tǒng)計學意義（P>0.05），TMP30和IRB80組與model組具有顯著差異性（P<0

3、.05），表明TMP30組川芎嗪能有效抑制單腎糖尿病大鼠腎臟過度代償。第4周除control組血糖、尿量、飲水量均有不同程度升高，較control組比較均有顯著差異（P<0.05），經過藥物治療后，第8周TMP30\TMP60\IRB80組血糖、尿量、飲水量均有所降低，但較model組無差異性，第12周各組血糖都較model組降低，但TMP30組血糖更接近于control組且與model組有顯著差異(P<0.05)，表明中、高劑量組川芎

4、嗪能有效改善糖尿病大鼠“三高”癥狀，同時可以有效降低血糖水平。第4、8、12周model組\TMP15組都出現(xiàn)高TG血癥、高TCHO血癥和24h-pro明顯升高，且與control組比較具有顯著差異性（P<0.05）。給藥后，第8周和12周TMP30\TMP60\IRB80組明顯改善了高TG血癥和高TCHO血癥，與model組比較具有差異性（P<0.05）。第8和12周TMP30\TMP60\IRB80組24h-pro明顯減少且和mod

5、el組比較P<0.05，具有統(tǒng)計學意義。第4、8、12周各組尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）值均比control增高，且具有統(tǒng)計學意義，P<0.05。藥物治療后，在8、12周TMP30\TMP60\IRB80組BUN、Scr值均有下降，但第8周model組和 IRB80組無統(tǒng)計學意義，與其他各組具有統(tǒng)計學意義，P<0.05，表明中、高劑量組能有效改善糖尿病大鼠腎臟功能。給藥8周后，在光鏡下觀察由腎臟組織HE、PAS及Masson染色的切

6、片，結果顯示：control組SD大鼠腎小球、腎血管等纖維結構未見異常，model組觀察腎小球肥大、腎小球內結構不清、腎基底膜增厚、毛細血管伴擴張，出現(xiàn)部分灶節(jié)段性腎小球硬化及腎臟纖維化，腎間質內見大量炎性細胞及淋巴細胞浸潤，基底膜明顯增厚，出現(xiàn)K-W(KimmelstielWilson)結節(jié)。TMP30\TMP60\IRB80組在8、12周治療后以上病理改變有不同程度的減輕。model組大鼠 PAS櫻桃色區(qū)域、Masson藍色區(qū)域均明

7、顯強于control組，系膜區(qū)也較control組顯著增厚增寬，表明糖尿病長期會對大鼠腎臟造成嚴重的病理損傷，會促進糖尿病腎病發(fā)展。TMP30\TMP60\IRB80組在8、12周治療后腎小球PAS、Masson陽性表達程度較model組和TMP15組明顯減弱。免疫組化學顯示，TGF-β1在 control組腎小球及腎小管細胞胞漿有少量表達，α-SMA、FN在control組腎小球及腎小管細胞胞核有少量表達，TGF-β1、α-SMA、F

8、N在其余各組均比control組表達明顯增強。經治療后TMP30\TMP60\IRB80組在8、12周表達減弱，12周比8周降低更加明顯，12周AOD值降低且和model組具有顯著差異性，P<0.05；Western blot檢測顯示，第12周，其余各組同control組比較，腎組織TGF-β1、α-SMA和FN蛋白表達均明顯增多，蛋白半定量分析具有顯著差異性（P<0.05），與model組比較，TMP30\TMP60\IRB80組TG

9、F-β1、α-SMA和FN蛋白表達均明顯下降，蛋白半定量分析具有顯著差異性（P<0.05），表明中、高劑量川芎嗪能有效改善腎臟纖維化。通過分析TGF-β1、α-SMA和FN AOD值（r=0.838，P<0.0001、r=0.922，P<0.0001），表明TGF-β1與α-SMA和FN具有正相關性，降低TGF-β1表達可以下調α-SMA和FN表達。
　　本研究表明，中、高劑量川芎嗪和厄貝沙坦可改善糖尿病“三高一少”的臨床表現(xiàn)，對

10、降低血糖也有一定的作用，但對其降糖機制未做研究。同時川芎嗪可以有效地改善早期糖尿病腎病腎臟功能，降低BUN、Scr水平和24h-pro排泄。本研究結果顯示：川芎嗪可以有效抑制致纖維化相關的蛋白因子 TGF-β1、α-SMA和FN的表達，達到抑制了炎癥細胞的增生和細胞外基質沉積的目的，改善腎小球硬化及腎臟纖維化，延緩腎臟病理結構被破壞，初步發(fā)現(xiàn)川芎嗪通過影響腎臟纖維化來實現(xiàn)糖尿病腎病的腎臟保護。本研究結果通過分析 TGF-β1與α-SMA