川芎嗪對大鼠膜性腎病防治作用的實驗研究.pdf

1、目的：探討TMP對C-BSA誘導(dǎo)的大鼠MN的防治作用和可能治療機制。 方法：將96只SD雄性大鼠隨機分為正常組(A組)、模型組(B組)、造模+TMP組(C組)、造模+強的松組(D組)，每組24只；除A組外，其余各組均按改良Border法[1]復(fù)制MN大鼠模型。于正式免疫第1、2、3、4周殺檢，動態(tài)檢測24hUTP，取大鼠腎組織進行光鏡、電鏡及免疫熒光鑒定成模情況并觀察不同時間點GBM增厚情況，用免疫組織化學(xué)方法動態(tài)檢測腎組織中t

2、-PA、u-PA、PAI-1、Col Ⅳ蛋白的含量，于正式免疫第4周末抽血行Scr、BUN、Ccr、Alb、TG、TC檢測，并進行GBM厚度，腎組織t-PA、u-PA、PAI-1、Col Ⅳ及腎功能之間的相關(guān)分析。 結(jié)果： (1)腎臟形態(tài)學(xué)改變 A組各時間點腎臟形態(tài)顏色正常，腎組織未見異常病理學(xué)改變，無IgG熒光顆粒沉積；B組、CN、D組于1周末，腎臟形態(tài)顏色正常，腎組織未見明顯病理學(xué)改變，腎小球毛細血管壁未見明顯IgG

3、熒光沉積；隨實驗時間延長腎臟體積增大，顏色逐漸變蒼白，腎臟病理損害逐漸加重，腎小球毛細血管壁IgG熒光沉積逐漸增多；4周末可見腎臟不同程度腫大，色蒼白，光鏡下見腎小球腫大明顯，部分球囊腔狹窄，GBM彌漫性增厚，系膜細胞增生，足突相互融合，部分足突變平或消失，腎小球上皮下有大量電子致密物沉積，GBM上皮側(cè)伸出突起形成“釘突”，部分腎小球可見釘突頂部融合，出現(xiàn)雙層梯狀結(jié)構(gòu)，間質(zhì)可見彌漫性或局灶性炎細胞浸潤，膠原纖維沉積明顯，纖維化程度重；腎

4、小球毛細血管壁IgG熒光較強，強度約為+++--++++。其中B組腎臟病理損害較其它各組最重，C、D兩組各時間點腎臟病理損害較重，兩組間無明顯差異。腎組織IgG熒光強度B組、C組、D組組間比較無明顯差別。 (2)腎組織t-PA、u-PA、PAI-1、Col Ⅳ蛋白的動態(tài)表達 A組腎組織t-PAu-PA表達較多，PAI-1、Col Ⅳ表達較少，各時間點無明顯差異(P>0.05)；隨實驗時間延長，B組、C組、D組t-PA、u-PA呈

5、逐漸下降趨勢，PAI-1、Col Ⅳ呈逐漸上升趨勢，以4周末差異尤為明顯(P<0.05)。與A組相比，B組、C組、D組t-PA、u-PA表達減少，PAI-1、Col Ⅳ表達增多，其中B組u-PA于1周末較A組顯著增多，以后較A組減少；與B組相比，C組、D組t-PA、u-PA表達增多，PAI-1、Col Ⅳ表達減少，其中以t-PA、Col Ⅳ變化為明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)：C組、D組組間相比，各時間點t-PA、u-PA、PA

6、I-1、Col Ⅳ表達無明顯差異(P>0.05)。 (3)臨床指標變化 A組各指標正常；B組Scr、BUN、TG、TC、24h UTP水平升高，Ccr、Alb降低，其中以Scr、BUN、Alb、24h UTP變化顯著(P<0.05)；與B組相比較，C組、D組Scr、BUN、TG、TC、24h UTP水平降低，Ccr、Alb水平升高，以4周末，Scr、BUN、Alb變化尤為明顯(P<0.05)；C組、D組組間比較，D組Scr、24

7、h UTP水平均較C組降低，以4周末差異尤為明顯(P<0.05)。 (4)各指標相關(guān)性分析 4周末，A組腎組織t-PA、u-PA與PAI-1，ColⅣ與GBM厚度呈正相關(guān)；B組腎組織ColⅣ與PAI-1，ColⅣ與GBM厚度，PAI-1與GBM厚度均呈正相關(guān)；CN腎組織ColⅣ與GBM厚度呈正相關(guān)；D組腎組織ColⅣ與GBM厚度呈正相關(guān)，其余各組各指標間無明顯相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： (1)運用改良Border法，能夠

8、成功造出Ⅲ-Ⅳ期MN病理模型，其臨床表現(xiàn)符合MN臨床特征。 (2)在MN腎組織中t-PA、u-PA的表達隨病變發(fā)展呈下降趨勢，PAI-1、Col Ⅳ呈上升趨勢，PAI-1與ColⅣ及GBM厚度呈正相關(guān)，t-PA、u-PA．與ColⅣ、GBM厚度及腎功能無明顯相關(guān)性。 (3)TMP可能通過增加腎組織t-PA表達，降低PAI-1表達，從而減少Col Ⅳ在腎臟的沉積，減輕或抑制：MN的病理損害的進展。 (4)TMP可減