白術(shù)麩炒過程中顏色與物質(zhì)基礎(chǔ)變化相關(guān)性研究.pdf

1、白術(shù)為菊科植物白術(shù)Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根莖，具有補氣健脾，燥濕利水，止汗安胎之功，被譽為“補氣健脾第一要藥”。白術(shù)炮制方法繁多，目前廣泛使用的有清炒、麩炒和土炒，其中又以麩炒白術(shù)為主。白術(shù)生用長于健脾燥濕，經(jīng)麩炒后藥性緩和，長于健脾益氣?！侗静菝绍酢分兄赋觥爸扑庂F在適中,不及則功效難求,太過則氣味反失”，《中國藥典》2010年一部對麩炒白術(shù)火候的描述為“炒至黃棕色，溢出焦香氣”；《四川省

2、中藥飲片炮制規(guī)范》對麩炒白術(shù)火候的描述為“炒至表面深黃色，有香氣溢出”?？梢妼Π仔g(shù)麩炒終點顏色表述不一，且顏色判斷都依賴藥工主觀判斷，炮制適中程度難以把握，不能有效保證麩炒白術(shù)質(zhì)量均一穩(wěn)定。
　　課題組前期分析了土炒對白術(shù)化學成分影響，活性物質(zhì)的代謝情況以及輔料土的吸附作用，為本課題相關(guān)化學成分含量測定方法研究提供了參考。本研究以麩炒白術(shù)為研究對象，引入過程論思想，采用二維在線紅外成像儀全程監(jiān)控白術(shù)炮制過程中飲片溫度變化；首次采用

3、色度空間理論，以L*、a*、b*值對麩炒過程中白術(shù)顏色變化進行量化分析；采用高效液相色譜法、分光光度法對麩炒過程中，白術(shù)物質(zhì)基礎(chǔ)變化規(guī)律進行探索；首次分析了白術(shù)炮制過程中飲片顏色與溫度、物質(zhì)基礎(chǔ)變化相關(guān)性，為白術(shù)炮制工藝的規(guī)范化研究和提高炮制飲片質(zhì)量標準提供科學依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下：
　　1樣品收集與制備
　　本研究所用白術(shù)樣品均購自四川某飲片公司，采用該公司炮制加工技術(shù)對白術(shù)進行了麩炒、清炒炮制，并于不同時間點取樣得研究

4、樣品。本次研究共收集了麩炒樣品5批，共計47個樣品，清炒白術(shù)1批，共計16個樣品。
　　2白術(shù)麩炒過程中飲片溫度、顏色變化相關(guān)性研究
　　首次采用色度空間理論對白術(shù)麩炒過程中飲片顏色進行量化分析，并采用二維在線紅外成像儀全程記錄白術(shù)炮制過程中溫度變化，以L*、a*、b*值對飲片顏色進行表征，對各取樣點溫度與樣品顏色相關(guān)性分析，溫度與L*、a*、b*、ΔEab二次曲線擬合相關(guān)性顯著（P<0.01）,初步表明將測色技術(shù)運用到中藥

5、炮制顏色判斷具有可行性。本研究為白術(shù)炮制過程建立數(shù)字化顏色評價模式奠定基礎(chǔ)。
　　3白術(shù)麩炒過程中物質(zhì)基礎(chǔ)變化規(guī)律研究
　　白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、多糖為白術(shù)主要活性成分，其含量高低直接影響臨床藥用，而其在炮制過程中變化規(guī)律尚未見報道；白術(shù)中糖類成分含量較高，而糖類成分在一定溫度條件下可與氨基酸結(jié)合發(fā)生麥拉德反應(yīng)(Maillard reaction)，使其外觀顏色發(fā)生變化，同時糖類成分自身也可發(fā)生降解，或者發(fā)生縮合反應(yīng)，形成中間

6、產(chǎn)物5-羥甲基糠醛。5-羥甲基糠醛產(chǎn)生過程中伴有焦香氣，與麩炒白術(shù)炮制過程中產(chǎn)生的味道相符，其在白術(shù)炮制過程中變化規(guī)律如何，與白術(shù)飲片顏色相關(guān)性如何尚未見報道。
　　3.1白術(shù)麩炒過程中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量變化規(guī)律研究
　　建立UPLC法測定白術(shù)麩炒過程中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量，結(jié)果表明白術(shù)從生品到麩炒焦過程中，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ含量呈下降趨勢，下降率為21.69％~57.94%；白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ含量變化較小，從生品到炒焦過程中，下降率

7、為13.68%~20.87%；白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量下降最多，下降率為38.16%~63.35%。而清炒白術(shù)在0~6min內(nèi)，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量略有增加，增加量分別為5.92%、12.38%、8.86%，之后白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量呈下降趨勢。
　　對輔料蜜麩中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量分析發(fā)現(xiàn)，炮制前蜜麩中不含有白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，炮制后各取樣點均能檢測到。表明白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量變化主要由加熱造成，輔料麥麩對白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ具有吸附

8、作用。
　　3.2白術(shù)麩炒過程中多糖含量變化規(guī)律研究
　　采用硫酸苯酚法測定各取樣點麩炒白術(shù)多糖含量，5批麩炒樣品在由生品到麩炒焦過程中多糖含量變化一致，即在9~15min之前，各批次白術(shù)多糖含量呈現(xiàn)出增加趨勢，增長率分別為65.95%、37.48%、74.2%、75.44%、42.96%，之后多糖含量開始減少。清炒白術(shù)在該過程中和麩炒白術(shù)表現(xiàn)出同樣的變化趨勢。表明白術(shù)多糖含量變化主要與炮制時間長短有關(guān)。
　　3.3白

9、術(shù)麩炒過程中單糖及二糖含量變化規(guī)律研究
　　單糖是麥德拉非酶褐變的物質(zhì)基礎(chǔ)，其在炮制過程變化規(guī)律如何有待深入研究。本論文首次建立HPLC-ELSD法測定白術(shù)飲片中游離單糖及二糖含量，并首次分析了白術(shù)麩炒過程中單糖及二糖含量變化規(guī)律。從生品到麩炒黃過程中，白術(shù)游離單糖主要為葡萄糖、果糖和二糖蔗糖，其含量隨著炮制時間延長逐漸減小，到炒焦過程中，色譜峰個數(shù)增加，且峰面積隨著炮制時間延長而增大，經(jīng)對照品比對后，確定色譜圖中新增峰為阿拉伯糖

10、、半乳糖、甘露糖和D-木糖。初步推測新增游離單糖為多糖在炮制過程中部分糖基脫落產(chǎn)生。
　　3.4白術(shù)麩炒過程中5-羥甲基糠醛（5-HMF）含量變化規(guī)律研究
　　本研究采用HPLC法測量各炮制樣品中5-HMF含量，發(fā)現(xiàn)白術(shù)生品中不存在5-HMF，隨著炮制時間延長，5-HMF明顯增加。表明白術(shù)炮制過程中發(fā)生了麥拉德反應(yīng)，且炮制時間、溫度是5-HMF含量增加的主要因素。
　　4白術(shù)麩炒過程中物質(zhì)基礎(chǔ)變化與飲片顏色相關(guān)性分析<

11、br>　　首次將白術(shù)化學成分白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、多糖、5-HMF與顏色值進行相關(guān)分析，結(jié)果表明飲片顏色值與物質(zhì)基礎(chǔ)具有顯著相關(guān)性，提示中藥炮制過程中，對飲片顏色準確把握是保證飲片質(zhì)量的前提。將飲片顏色值與物質(zhì)基礎(chǔ)相結(jié)合，可為白術(shù)炮制研究提供新思路。
　　4.1麩炒白術(shù)白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量與顏色值L*、a*、b*的相關(guān)性分析
　　采用SPSS17.0對白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量與顏色值L*、a*、b*及ΔEab進行Pearson

12、相關(guān)性分析，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量與L*呈正相關(guān)，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量與a*呈負相關(guān)；白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅲ含量與ΔEab呈負相關(guān)，白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ與ΔEab呈正相關(guān)。說明白術(shù)飲片顏色能夠反應(yīng)藥材物質(zhì)基礎(chǔ)變化，同時通過對白術(shù)飲片顏色進行量化研究，可為白術(shù)炮制工藝規(guī)范化提供參考依據(jù)。
　　4.2麩炒白術(shù)多糖含量與顏色值L*、a*、b*的相關(guān)性分析
　　采用SPSS17.0對多糖含量與飲片顏色相關(guān)性進行分析，發(fā)現(xiàn)多糖與L*、ΔEab曲線回歸

13、擬合最好，相關(guān)性顯著（P=0.001<0.01），而多糖與b*存在顯著線性相關(guān)性。而多糖含量與a*值相關(guān)性不具有統(tǒng)計意義。
　　4.35-HMF含量與顏色相關(guān)性分析
　　采用SPSS17.0對白術(shù)麩炒過程中飲片顏色值L*、a*、b*與5-HMF含量進行Pearson相關(guān)性分析。5-HMF含量與L*呈負相關(guān)（P=0.001<0.01）；5-HMF與a*無直線相關(guān)關(guān)系；5-HMF含量與b*呈負相關(guān)；ΔEab表示麩炒飲片顏色與生品

14、顏色的差值，其與5-HMF含量有正相關(guān)關(guān)系（P=0.000<0.01）。表明5-HMF含量能夠反應(yīng)白術(shù)炮制程度，可作為炮制過程中飲片質(zhì)量的控制指標，為白術(shù)麩炒炮制規(guī)范研究提供參考。
　　5麩炒白術(shù)正己烷提取部位成分變化研究
　　采用GC-MS法對不同麩炒時間白術(shù)正己烷提取部位化學成分變化進行分析。本研究共得到57個成分，鑒定了40個，未鑒定17個，未鑒定部分占總量的11.79%~10.62%，所有化合物中以蒼術(shù)酮含量最高。白