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文檔簡介
1、目的:探討益氣養(yǎng)血方干預Hulth法造模的兔KOA模型血清中IL-1β、TNF-α的表達,軟骨組織形態(tài)學變化及軟骨細胞凋亡情況,并對益氣養(yǎng)血方的安全性進行評估。
方法:40只日本大耳白兔隨機分為4組,即假手術組、KOA模型組、陽性藥組(雙醋瑞因)、益氣養(yǎng)血方組各10只。每組動物自由飲水進食1周后開始實驗。其中KOA模型組、陽性藥組(雙醋瑞因)、益氣養(yǎng)血方組均以改良Hulth法復制右膝OA模型,假手術組方法相同,但不切斷內(nèi)側(cè)
2、副韌帶、前后交叉韌帶,不切除內(nèi)側(cè)半月板。術后4周開始給藥,假手術組、KOA模型組以生理鹽水灌胃,每日1次;陽性藥組(雙醋瑞因)、益氣養(yǎng)血方組分別按換算結(jié)果配制藥液灌胃,每日1次,連續(xù)6周。10周后取兔血清及雙膝關節(jié),ELISA泫檢測血清IL-1β、TNF-α含量,HE染色觀察關節(jié)軟骨形態(tài)學變化,TUNEL法檢測軟骨細胞凋亡,并進行急性毒性實驗。
結(jié)果:1、HE染色觀察關節(jié)軟骨形態(tài)學變化:形態(tài)學分析顯示假手術組膝關節(jié)軟骨層結(jié)
3、構(gòu)正常;模型組膝關節(jié)軟骨層破壞嚴重;陽性藥組、益氣養(yǎng)血方組膝關節(jié)軟骨層破壞較模型組明顯減輕。
2、模型組血清TNF-α水平明顯高于假手術組,組間對比有顯著差異(P<0.05);而益氣養(yǎng)血方組、陽性藥組血清TNF-α水平低于模型組,組間對比有顯著差異(P<0.05,P<0.01)。
3、模型組血清IL-1β水平明顯高于假手術組,組間對比有顯著差異(P<0.01);而陽性藥組血清IL-1β水平低于模型組,組間對比
4、有顯著差異(P<0.01);益氣養(yǎng)血方組血清IL-1β水平低于模型組,組間對比無顯著差異(P>0.05)。
4、鏡下觀察假手術組基本見不到凋亡的細胞;模型組凋亡細胞數(shù)量明顯增多;益氣養(yǎng)血方組凋亡細胞數(shù)量明顯少于模型組。
5、小鼠的最大灌胃體積量相當于臨床成人(體重按70kg計)擬用量的195倍。
結(jié)論:1、假手術對膝關節(jié)軟骨未造成損害;益氣養(yǎng)血方對膝關節(jié)軟骨有保護作用。
2、益氣養(yǎng)
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