斑點叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表達及其功能的初步研究.pdf

1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文斑點叉尾徊病毒「6和F10基因的原核表達及其功能的初步研究TheProkaryoticexPressionofthechaneleatfishvirusO盯6andORFIOgeneandtheirfunetionanalysis研究生:王樹云指導教師:陳孝煊教授李莉娟博士專業(yè):水產(chǎn)養(yǎng)殖獲得學位名稱:農(nóng)學碩士研究方向:水產(chǎn)動物疾病防治獲得學位時間:2010年6月華中農(nóng)業(yè)大學水產(chǎn)學院二O一O年六月華中農(nóng)業(yè)大學

2、2010屆碩士研究生學位論文1材料和方法....................................................................................................……171.1實驗材料......................................................................................……，

3、....……171.1.1病毒、菌株和載體..............................................................................……171.1.2原核載體構建主要試劑及來源..........................................................……171.1.3蛋白表達和鑒定的主要試劑及來源.................

4、.................................……181.1.4實驗所用儀器設備及產(chǎn)地..................................................................……181.2實驗方法..........................................................................................

5、.......……191.2.1特異性引物的設計與基因的PCR擴增.............................................……191.2.2原核表達載體的構建.........................................................................……191.2.3目的基因在大腸桿菌中的誘導表達...........................

6、......................……221.2.4表達蛋白的W亡stemBlot檢測..........................................................……222結果與分析.......................................................................................................…

7、…222.1ORF6ORF10的PCR擴增及重組表達載體的酶切鑒定.................……222.2ORF6和ORF10在大腸桿菌中的誘導表達........................................……242.2.1目的基因的誘導表達..........................................................................……242.2.2表

8、達產(chǎn)物的可溶性分析...................................................……，..........……，.243討論...................................................................................................................……27第四章ORF6和ORF10的抗體的制備

9、及其保護性研究.......................................……291材料和方法.......................................................................................................……291.1實驗材料..................................................

10、...............................................……291.1.1細胞、病毒..........................................................................................……291.1.2實驗試劑和耗材.....................................................

11、.............................……291.2實驗方法.................................................................................................……301.2.1表達蛋白的純化...................................................................

12、...............……301.2.2多克隆抗體的制備..............................................................................……301.2.30舒6和ORFro多克隆抗體的保護性實驗......................................……312結果與分析.................................

13、..................................……，.............................……312.1多克隆抗體的特異性檢測.....................................................................……312.2ORF6和ORF10多克隆抗體的保護性研究.......................................

14、..……323討論...................................................................................................................……32參考文獻........................................................................................