棉鈴蟲核型多角體病毒ORF34、ORF44的序列分析與原核表達.pdf

1、棉鈴蟲核型多角體病毒(HearNPV)可特異性侵染棉鈴蟲，是理想的棉鈴蟲生物防治因子。HearNPV的兩個分離株C1、G4的基因組全序列已經測定。一些基因的功能已經闡明，ORF34、ORF44是兩個功能未知的基因，本研究對ORF34、44基因進行了克隆、序列分析和原核表達研究，首次分析并確認了HearNPV的ORF34、ORF44基因為HearNPV的特有基因，基因表達產物也為后續(xù)研究提供了基礎。 HearNPV ORF34基因

2、全長1080nt，編碼359aa，預測編碼蛋白分子量為41.2 kDa。序列分析顯示，ORF34具有三個桿狀病毒早期基因轉錄啟動子特征序列。分析發(fā)現(xiàn)ORF34的推導氨基酸序列中含有1個強跨膜螺旋區(qū)域，15個磷酸化位點和1個糖基化位點。除HezeNPV ORF34外，未發(fā)現(xiàn)與ORF34氨基酸同源性高于30％的基因。構建了pET-34表達載體，并在大腸桿菌BL21中得到了表達，表達的融合蛋白分子量為42kDa，與預測編碼蛋白分子量大小相符。

3、序列分析研究結果表明ORF34是HearNPV的一個特有基因。 HearNPV ORF44基因全長1137nt，編碼378aa，預測編碼蛋白分子量為42.7kDa。序列分析顯示，ORF44具有雙相啟動子特征序列，同時兼有桿狀病毒早期和晚期基因轉錄啟動子特征序列。分析發(fā)現(xiàn)ORF44的推導氨基酸序列中含有1個強跨膜螺旋區(qū)域，32個磷酸化位點和4個糖基化位點。除HezeNPV ORF45外，未發(fā)現(xiàn)與ORF44氨基酸同源性高于30％的基