豬DCD供胰不同熱缺血時間的病理變化.pdf

1、糖尿病已成為嚴重威脅人類健康的重大公共衛(wèi)生問題，患病率逐年增加，經(jīng)過人們不懈努力，胰腺/胰島移植已成為治療糖尿病的有效手段，但由于供者的短缺，限制了器官移植手術的大量開展，同時也造成相當一部分病人由于無法及時施救而在等待移植期間死亡。目前，心死亡供者(donors of cardiac death，DCD)已成為國際上公認的供者三大來源之一。在我國，DCD是供胰的主要來源。但供胰不可避免地經(jīng)歷了一段熱缺血損傷，熱缺血時間指心臟停搏至低溫

2、灌注開始前的一段時間，缺血時間與灌注保存方法均影響移植并發(fā)癥的發(fā)生和預后。因此，進一步尋找更加有效的供胰保護措施，是當今胰腺移植研究領域亟待解決的問題。
　　 目的:
　　 建立豬DCD模型，觀察不同熱缺血時間DCD供胰的病理變化。
　　 方法:
　　 實驗動物選取杜洛克大白長白三元雜交豬(n=10)。心臟死亡模型采用窒息法。實驗動物麻醉為復合麻醉:誘導麻醉采用速眠新Ⅱ(0.1ml/kg)聯(lián)合丙泊酚(2m

3、g/kg)鎮(zhèn)靜催眠。氣管插管后丙泊酚聯(lián)合羅庫溴銨維持麻醉。呼吸機設置:潮氣量10mL/kg，呼吸頻率15次/分。手術過程中保持中心體溫在37.8-38.3℃，維持PaCO2在35-45mmHg，氣道峰壓(Peak inspiratory Pressure，PIP)＜25cm H2O。手術過程持續(xù)監(jiān)測心率、有創(chuàng)動脈壓、中心靜脈壓、末梢血氧飽和度?；A數(shù)據(jù)穩(wěn)定后，在深度麻醉下撤除呼吸機，PaO2急劇下降，PaCO2逐漸增加，出現(xiàn)高碳酸血癥，

4、導致反射性高血流動力學改變，5min內(nèi)出現(xiàn)反應性血壓升高和心動過速，隨后出現(xiàn)血壓逐漸下降、心臟停跳。撤除呼吸機后11-28min后死亡，平均時間為19.25min。撤除呼吸機后30分鐘內(nèi)每5分鐘取胰腺組織，切取后器官10％甲醛固定，蠟塊包埋，行HE染色觀察病理改變情況。
　　 結(jié)果:
　　 出血:0-10min無出血，10min開始，血管內(nèi)可見微小血栓形成，至20min，血管內(nèi)可見紅細胞聚集，但無出血，25min開始有出

5、血傾向，血管壁完整性破壞，30min，出血突然加重，紅細胞成片密集分布，廣泛小葉間出血。水腫:0-10min無水腫，10min輕度水腫，15-30min中度水腫，部分細胞胞體擴大，胞漿淡染，細胞界限不清，水腫明顯。腺細胞破壞:0-15min未見腺細胞破壞，從20min開始，破壞逐漸加重，30min破壞嚴重，見胰腺結(jié)構(gòu)破壞，腺泡結(jié)構(gòu)消失，細胞解離。炎癥:炎癥反應在熱缺血0-30min內(nèi)均不明顯，未見炎性細胞浸潤。
　　 討論:

6、r>　　 通過豬DCD供胰不同熱缺血時間的病理變化，可以看出，DCD供胰在不可避免的熱缺血時間內(nèi)，出血，水腫，腺細胞破壞都隨著時間的延長，進行性加重。如何避免器官的熱缺血損失，提高器官利用率，讓器官移植造福于更多人，是我們接下來研究的重點。低溫機械灌注可以連續(xù)給臟器細胞提供基本必需的底物，例如糖，氨基酸，核苷酸，氧等，可以持續(xù)處理毒性代謝產(chǎn)物，阻斷生物降解的過程。同單純低溫保存相比，低溫機械灌注保存主要優(yōu)點是能持續(xù)給臟器細胞提供維持其