損傷對成年小鼠胚胎基因Tbx18影響的實驗研究.pdf

1、研究背景：心血管系統(tǒng)疾病已經(jīng)成為現(xiàn)代社會嚴重威脅人類健康，引起死亡的主要疾病，而目前心肌梗死在臨床上的發(fā)病率及病死率非常高，于是研究心肌梗死的發(fā)病機制并開展新療法己迫不及待。大量的臨床研究試圖通過外源細胞的移植來修復受損的心肌，但問題落腳在心功能的改善是否與長遠利益相關，甚至這種改善是否僅限于某些種類的患者，至今很少有人知道。近年來，利用干細胞或祖細胞為基礎的心血管疾病的再生治療概念已深入人心。
　　研究目的：研究心肌梗死損傷對成

2、年小鼠心臟轉錄因子Tbx18表達的影響。
　　方法：我們采用右側臥位經(jīng)胸骨左旁第3、4肋骨間橫切口結扎冠狀動脈左前降支的方法來建立成年小鼠心肌梗死損傷模型，通過肌鈣蛋白試劑盒檢測小鼠術后24小時內cTnT釋放情況、術后7天心臟組織病理檢測兩種方法來證明模型成功，采用RT-PCR方法檢測心肌梗死損傷后不同天數(shù)的心肌組織梗死區(qū)Tbx18mRNA的表達趨勢，用組織免疫熒光染色方法來定位心肌梗死損傷后胚胎基因Tbx18的表達，用Weste

3、rn Blot方法檢測心肌梗死后Tbx18蛋白的表達情況。
　　結果：經(jīng)右側臥位橫切口方法我們成功建立了成年小鼠心肌梗死損傷模型，存活率及準確率較傳統(tǒng)的仰臥位縱切口方法有顯著的提高，術后24小時內cTnT陽性，初步提示模型制作成功，術后7天心肌組織Masson結果提示梗死區(qū)及周邊區(qū)有大量膠原沉積，并出現(xiàn)明顯纖維化，最終確定模型建立成功。RT-PCR結果提示隨著心梗天數(shù)的遞增Tbx18mRNA的表達呈先升高后降低的趨勢，且心梗組的表