兩棲類抗菌肽Temporin--1CEa對人乳腺癌SK--BR3細胞作用機制的研究.pdf

1、分類號：密級：學校代碼：10165學號：201111037遣掌彥可耗大學碩士學位論文②兩棲類抗菌肽Temporin1CEa對人乳腺癌SK—BR3細胞作用機制的研究作者姓名：學科、專業(yè)：研究方向：導師姓名：英馨月有機化學多肽生物化學王澈副教授尚德靜教授2014年O5月遼寧師范大學碩士學位論文摘要乳腺癌是威脅人類身心健康的一個重大殺手，近年來研究表明，乳腺癌分為多種類型，其中HER2過表達的乳腺癌細胞因惡性程度高、生存率低而成為當前研究的重

2、點。目前針對這種抗原的單克隆抗體藥物已經上市，而部分患者用藥初期就出現了耐藥性，所以研究和開發(fā)針對此類乳腺癌的藥物成為當前的熱點。本論文研究所用的SKBR3細胞就是一種HER2過表達的乳腺癌細胞。抗菌肽因其具有分子量小、熱穩(wěn)定性高、強陽離子性等特點成為近年來國內外研究的熱點。Temporin1CEa是從林蛙皮膚分泌物中提取的一種Q螺旋抗菌肽，具有很好的抗癌活性。本論文主要探討抗菌肽Temporin1CEa對人乳腺癌SKBR3細胞的作用機

3、制。首先通過MTT法和LDH法檢測Temporin1CEa對人乳腺癌SKBR3細胞的抑制作用及細胞毒性，AnnexinV／PI雙染法檢測Temporin1CEa對SKBR3細胞的作用方式，并利用掃描電鏡觀察Temporin1CEa作用后細胞的形態(tài)變化。最后用DiBAC4(3)、Rhodaminel23、Flu03AM和活性氧試劑盒分別檢測細胞的跨膜電位、線粒體膜電位、以及細胞內活性氧水平和[Caz]濃度的變化。實驗結果表明Tempori

4、n1CEa對SKBR3細胞具有抑制作用和細胞毒性，而且隨著濃度的增加抑制作用及毒性增強，與時間無明顯關聯。掃描電鏡觀察Temporin1CEa作用于SKBR3細胞后，細胞的形態(tài)發(fā)生了變化，濃度越大細胞破損越嚴重，由完整變?yōu)榘枷?，最后變成碎片。DiBAC4(3)和Rhodaminel23檢測結果表明，Temporin1CEa作用SKBR3細胞后，細胞膜的跨膜電位升高，發(fā)生去極化現象導致膜的通透性增強。而且細胞線粒體膜電位下降，說明線粒體膜