亞麻脫膠微生物的篩選、鑒定及其多樣性研究.pdf

1、亞麻纖維作為一種重要的紡織原料，深受人們的喜愛(ài)。關(guān)于亞麻纖維的脫膠方法有物理脫膠法、化學(xué)脫膠法和生物脫膠法。目前應(yīng)用和研究較多的是生物脫膠方法。生物法又分為微生物脫膠和酶法脫膠。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)亞麻脫膠研究較多的是微生物脫膠和酶法脫膠。本文在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)亞麻脫膠的相關(guān)參數(shù)和幾個(gè)影響因素進(jìn)行了研究，通過(guò)測(cè)定脫膠酶的活性分析了對(duì)亞麻脫膠的影響，篩選出了四株高效脫膠菌并做了鑒定，對(duì)脫膠菌的產(chǎn)果膠酶活性影響因素進(jìn)行了研究，提取了亞麻發(fā)酵液用DGG

2、E的方法研究了不同條件下脫膠微生物的多樣性。主要研究?jī)?nèi)容結(jié)果如下：
　　 ⑴在亞麻脫膠的過(guò)程中，微生物活菌數(shù)在脫膠前期迅速升高，后期下降；脫膠酶果膠酶、纖維素酶和木聚糖酶起著重要作用，果膠酶含量明顯高于其他兩種酶活性；含氮量和還原糖在脫膠前期都迅速增加，脫膠過(guò)程中微生物利用碳源，還原糖含量在波動(dòng)中稍有下降，總氮在波動(dòng)中有所上升；pH值前期迅速下降，后期趨于穩(wěn)定；脫膠過(guò)程中，COD一直在升高，前期增長(zhǎng)迅速，后期緩慢。在脫膠影響因素

3、中，選擇溫度，水浴比，pH值和脫膠助劑。在溫度為35℃時(shí)，水浴比在1:20左右，pH在6或8，脫膠效果較好，脫膠酶活性較高。加入尿素的脫膠助劑相對(duì)加入其他助劑和不加的果膠酶活性較高，加入硝酸銨的相對(duì)于其他的木聚糖酶活性較高。
　　 ⑵土壤基質(zhì)中含有豐富的微生物，亞麻脫膠時(shí)加入不同土壤基質(zhì)，篩選出50多株脫膠菌，又通過(guò)復(fù)篩的方法，從中篩選出4株脫膠效果相對(duì)較高的脫膠菌，對(duì)4株脫膠菌進(jìn)行了基因序列測(cè)序和生理生化的測(cè)定，初步鑒定GJ-

4、87-1、GJ-87-2和GJ-87-3為芽孢桿菌屬，GJ-86-6為類(lèi)芽孢桿菌屬的一個(gè)種。對(duì)4株菌進(jìn)行了亞麻脫膠的應(yīng)用研究，測(cè)定了脫膠液中的相關(guān)酶活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加菌脫膠之后脫膠液中的果膠酶和木聚糖酶活性顯著增高，纖維素酶活性較低。符合亞麻脫膠用菌的要求。測(cè)定了脫膠液中其他相關(guān)參數(shù)，還原糖，總含氮量、pH值和脫膠率等。測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加菌之后還原糖變化不太顯著，總含氮量明顯增高，脫膠率提高，pH略顯堿性。
　　 ⑶對(duì)4株高效脫膠

5、菌產(chǎn)酶活性的影響因素溫度、pH值、碳源、氮源和金屬離子做了相關(guān)性的研究。在35℃左右，脫膠菌產(chǎn)果膠酶活性最高；在底物偏酸性的環(huán)境下，果膠酶活性相對(duì)較高；對(duì)于碳源的影響，在加入麩皮和豆粉的培養(yǎng)基中，果膠菌產(chǎn)果膠酶活性相對(duì)較高；在氮源加入硫酸銨時(shí)，果膠菌產(chǎn)酶活性相對(duì)較高；不同金屬離子對(duì)4株脫膠菌的產(chǎn)酶活性影響各不相同。
　　 ⑷從亞麻發(fā)酵液提取不同時(shí)間段發(fā)酵液中的細(xì)菌總DNA，應(yīng)用PCR-DGGE技術(shù)，分析了亞麻發(fā)酵液中的微生物多樣