菜籽多糖酸法提取及其抗氧化活性研究.pdf

1、菜籽餅粕是油菜籽經(jīng)榨油加工后的副產(chǎn)品總稱。長期以來,由于人們對于菜籽餅粕中的成分研究不夠深入,因此主要將其作為部分飼用蛋白替代物或肥料使用。近年來,由于對膜的化學功能、免疫物質(zhì)及新藥物資源等研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)多糖在生物體內(nèi)不僅作為能量資源或結(jié)構(gòu)材料,更重要的是還參與了生命現(xiàn)象中細胞的各種活動,具有多種多樣的生物學功能。為此,本文對菜籽多糖的提取、分離純化及抗氧化活性方面進行了研究,期望為菜籽餅粕中的多糖成分利用提供一定的資料。主要結(jié)論

2、如下:
　　 1、本實驗利用響應面分析法對菜籽多糖的酸法提取工藝進行優(yōu)化。在單因素實驗的基礎(chǔ)上,選取酸濃度、料液比、提取時間、提取溫度進行了4因素3水平的Box-Behnken中心組合研究,并運用DesignExpert7.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析。建立了以上4個主要因素對酸提菜籽多糖得率影響的數(shù)學模型,并通過響應面分析法對提取條件進行了優(yōu)化,確定了酸法提取菜籽多糖的最佳工藝。實驗結(jié)果表明,各提取因素對酸提菜籽多糖得率的影響順序

3、為:提取溫度＞酸濃度＞提取時間＞料液比。所得最佳提取條件為:酸濃度0.28mol/L、料液比43.05mL/g、提取時間5h和提取溫度71.9℃,在此條件下預期的多糖得率是4.07％,實際得率為4.01％。
　　 2、離子交換色譜法和凝膠排阻色譜法是兩種常用的多糖分離方法。本實驗即是利用以上兩種方法進行菜籽多糖的分離純化。選用DEAE-SephadexA-25和SephadexG-100對菜籽粗多糖進行逐級純化,純化效果顯著,最

4、終得到RSP-1-1組分。最后,通過SephadexG-100凝膠柱層析和濾紙電泳試驗表明菜籽多糖RSP-1-1是分子量分布相對均一的多糖。經(jīng)測定菜籽多糖RSP-1-1中中性糖含量為68.4％,蛋白質(zhì)含量為4.6％,糖醛酸含量19.7％。
　　 3、對于抗氧化性的研究,本實驗選擇了四種常見的體外抗氧化活性測試方法,分別是:還原能力測定、超氧陰離子自由基清除能力測定、羥基自由基清除能力測定以及DPPH自由基清除能力測定。測試的對象

5、為酸提菜籽粗多糖RSP（粗）和分離純化后所得較均一級分RSP-1-1。實驗結(jié)果表明,酸法提取的菜籽多糖各級分均具有一定的清除羥自由基、DPPH自由基的能力及還原能力。同時,通過實驗發(fā)現(xiàn),兩種菜籽多糖級分對于超氧陰離子自由基的清除幾乎沒有作用。當多糖濃度為2mg/mL時,RSP（粗）對DPPH自由基清除能力能達到49.9％,RSP-1-1的清除能力能達到26.7％:當多糖濃度為4mg/mL時,RSP（粗）對羥基自由基的清除能力能達到30.