黃芪對(duì)同種移植受體糖皮質(zhì)激素受體和皮質(zhì)醇的影響及意義.pdf

1、目的意義:
　　 糖皮質(zhì)激素(GC)是目前臨床應(yīng)用最廣泛的免疫抑制劑，但是它只有與糖皮質(zhì)激素受體(GR)結(jié)合才能發(fā)揮其免疫抑制作用。近年來(lái)，隨著受體放射配基結(jié)合分析法(RBA，Radioligang Binding Assay)的完善和分子生物學(xué)的快速發(fā)展，GR的研究日趨活躍。研究表明，測(cè)定移植受體的GR對(duì)闡明免疫抑制劑的作用機(jī)制和指導(dǎo)臨床治療均具有重要作用。
　　 皮質(zhì)醇是內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素，血清皮質(zhì)醇水平與機(jī)體GR密切

2、相關(guān)，在研究移植受體GR的同時(shí)，分析血清皮質(zhì)醇的變化，對(duì)于了解移植受體糖皮質(zhì)激素的代謝狀況，指導(dǎo)抗排斥治療具有重要意義。
　　 近年來(lái)，隨著免疫抑制治療的發(fā)展，同種器官移植的成功率明顯提高。理想的免疫抑制劑應(yīng)該既能消除移植受體的排斥反應(yīng)又不會(huì)造成免疫缺陷。臨床常用的免疫抑制劑包括：化學(xué)藥物免疫抑制劑（如環(huán)磷酰胺、環(huán)胞素A等）和抗體類(lèi)生物免疫抑制劑，雖然在一定程度上能夠延長(zhǎng)患者生存時(shí)間，但其毒副作用較嚴(yán)重（如：骨髓抑制、嚴(yán)重的肝腎

3、毒性等），往往因?yàn)榛颊卟荒苣褪芏Ｖ褂盟?，而且這些藥物價(jià)格昂貴，經(jīng)濟(jì)上亦難以承受。因此開(kāi)發(fā)新型高效低毒的免疫抑制劑已成為目前研究的熱點(diǎn)。
　　 中藥黃芪可以補(bǔ)氣益氣。研究表明不同劑量的黃芪對(duì)機(jī)體免疫功能的影響不同，黃芪具有免疫增強(qiáng)和免疫抑制的雙重調(diào)節(jié)作用。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)黃芪注射液體內(nèi)應(yīng)用可以明顯延長(zhǎng)同種移植物生存時(shí)間，但是其具體作用機(jī)制，尤其是對(duì)糖皮質(zhì)激素代謝的影響尚不清楚。
　　 本課題在成功建立小鼠同種皮膚移植

4、模型的基礎(chǔ)上，利用受體的放射配基結(jié)合分析和放射免疫分析法，探討了中藥黃芪注射液(AMI)體內(nèi)應(yīng)用后糖皮質(zhì)激素受體和血清皮質(zhì)醇的變化及對(duì)同種移植物生存的影響，旨在為臨床應(yīng)用黃芪注射液抗移植排斥奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1、建立同種移植小鼠模型；
　　 2、體內(nèi)應(yīng)用中藥黃芪(AMI)后，逐日觀察同種移植小鼠移植物生存狀況；
　　 3、應(yīng)用受體放射配基結(jié)合分析測(cè)定同種皮膚移植后不同時(shí)間脾細(xì)胞糖皮質(zhì)激素

5、受體(GR)結(jié)合位點(diǎn)；應(yīng)用RT-PCR測(cè)定GRmRNA水平；
　　 4、利用放射免疫分析檢測(cè)皮片移植后不同時(shí)間的血清皮質(zhì)醇水平。
　　 結(jié)果:
　　 1、同種移植早期小鼠脾細(xì)胞GR結(jié)合位點(diǎn)數(shù)和血清皮質(zhì)醇明顯升高，此后逐漸下降，在排斥高峰期（第14d）達(dá)到最低值。
　　 2、單用AMI(60g/kg)或環(huán)磷酰胺(CTX，100mg/kg)及二者聯(lián)合應(yīng)用均可顯著延長(zhǎng)同種移植物的生存時(shí)間，二者聯(lián)合應(yīng)用組小鼠的生