肝癌細胞流變特性的初步研究.pdf

1、重慶大學(xué)博士學(xué)位論文肝癌細胞流變特性的初步研究姓名：吳澤志申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師：蔡紹皙2000.9.1重鏖奎堂壁主蘭垡堡苧一——的粘彈性系數(shù)主要反映了張力整合的細胞骨架的整體抗拉特性，細胞微絲結(jié)構(gòu)對于決定細胞粘彈特性具有重要的作用。在細胞骨架干擾劑作用下，肝細胞和肝癌細胞粘彈特性效應(yīng)方式或強度的差異可能反應(yīng)了兩種細胞細胞骨架結(jié)構(gòu)和機能狀態(tài)或者兩種細胞對細胞骨架干擾劑處理敏感性的差異。在一較大劑量范圍的VBL作用下

2、，肝癌細胞粘彈性系數(shù)基本上呈單調(diào)劑量依賴性下降，這可能反應(yīng)了該類藥物用于臨床化療時對癌細胞的細胞流變學(xué)效應(yīng)。(2)采用分步裱襯的方法制備IV型膠原／層粘連蛋白(LN)／纖維連結(jié)蛋白(FN)裱襯表面，定量研究了肝癌細胞和肝細胞在上述ECM成分裱襯表硅的粘附力學(xué)特性。定義細胞粘附力為細胞同相應(yīng)裱襯表面粘附分離的臨界負壓值與微吸管橫截面積的乘積，以該粘附力作為細胞粘附性的定量指標。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，細胞在IV型膠原單一裱襯表面的粘附力表現(xiàn)出對IV型膠

3、原裱襯濃度較好的依賴性。當Iv型膠原裱村濃度從lg／m1增加至5pg／ml時，肝癌細胞粘附力增加幅度(202x10。o牛頓，26％)遠遠小于肝細胞粘附力增加幅度(156610。10牛頓，742％)，并呈現(xiàn)飽和效應(yīng)，IV型膠原裱襯濃度超過2Itg／ml時，肝癌細胞粘附力不再增加。LN與IV型膠原復(fù)合裱襯并不一定導(dǎo)致肝細胞和肝癌細胞在IV型膠原裱襯表面的粘附力增加。在特定的復(fù)合裱襯濃度(0625Itg／ml或125肛g／m1)，LN使肝細胞

4、或肝癌細胞在IV型膠原裱襯表面的粘附力達到最大值，其余濃度的LN與IV型膠原復(fù)合裱襯均引起細胞粘附力的下降。在所研究的濃度范圍(卜20懈／m1)內(nèi)及現(xiàn)有實驗條件下，F(xiàn)N與IV型膠原復(fù)合裱襯并不引起肝癌細胞在IV型膠原裱襯表面的粘附力發(fā)生明顯的變化。上述結(jié)果提示肝癌細胞與IV型膠原的粘附特性較之肝細胞發(fā)生了明顯的變化。LN是調(diào)節(jié)肝細胞和肝癌細胞與IV型膠原粘附特性的重要因素。(3)用四種人工合成肽精～甘一天冬一絲(RGDS)、甘一精一甘一

5、天冬～蘇～脯(GRGDTP)、酪一異亮一甘一絲～精(YIGSR)和半胱一天冬一脯一甘一酪一異亮一甘一絲一精(CDPGYIGSR)研究了肝癌細胞在IV型膠原／層粘連蛋白／纖維連結(jié)蛋白裱襯表面的粘附性對兩種粘附識別序列RGD和YIGSR的依賴性。為了歸納和整理實驗結(jié)果，根據(jù)競爭性抑制的原理，采用一簡單的函數(shù)F=b／(7a)叼擬合細胞平均粘附力F與競爭抑制性肽濃度I的關(guān)系。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肝癌細胞在IV型膠原裱襯表面的粘附性為RGD依賴性而非Y