原發(fā)瘤切除對(duì)荷人骨肉瘤裸鼠肺轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、目的：在構(gòu)建荷人骨肉瘤裸鼠模型的基礎(chǔ)上，觀察原發(fā)瘤切除前后裸鼠體內(nèi)血管生成水平的變化及其對(duì)骨肉瘤肺轉(zhuǎn)移的影響，為研究伴發(fā)性腫瘤抵抗機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)學(xué)基礎(chǔ)。
　　 方法：采用骨肉瘤細(xì)胞懸液法構(gòu)建荷人骨肉瘤裸小鼠模型。將0.2ml骨肉瘤細(xì)胞懸液(約2.0×106個(gè)細(xì)胞)注射至裸鼠左前肢皮下，接種兩周后開始分組，左前肢皮下腫瘤作為原發(fā)瘤。1、原發(fā)瘤切除對(duì)裸鼠體內(nèi)血管生成的影響。①原發(fā)瘤切除前后VEGF、內(nèi)皮抑素的變化?？瞻捉M、對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)

2、組各20只，成瘤后第7天、第14天、第21天每組取5只處死抽血。第21天，實(shí)驗(yàn)組剩余5只行左前肢截肢術(shù)(切除原發(fā)瘤)，對(duì)照組剩余5只行右前肢截肢術(shù)，空白組剩余5只不做處理，一周后全部處死抽血。用ELISA檢測(cè)血清中內(nèi)皮抑素和VEGF的濃度。②原發(fā)瘤切除前后裸鼠體內(nèi)Matrigel膠體中血紅蛋白濃度的變化?？瞻捉M、對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各20只，成瘤后第7天、第14天、第21天每組取5只在腹部皮下注射Matrigel膠體0.5ml(含有bFGF2

3、00ng，肝素50u)，分別在注射一周后處死取出膠體。第21天，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組剩余裸鼠行手術(shù)處理(手術(shù)同上)，并在腹部皮下注射Matrigel膠體，空白組僅注射膠體，一周后全部處死取出膠體。用HiCN法檢測(cè)其中血紅蛋白的濃度。2、原發(fā)瘤切除對(duì)骨肉瘤肺轉(zhuǎn)移的影響?？瞻捉M、對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各20只，接種腫瘤兩周后，實(shí)驗(yàn)組行左前肢截肢術(shù)，對(duì)照組行右前肢截肢術(shù)，空白組不做手術(shù)處理，兩周后處死裸鼠解剖觀察有無肺部轉(zhuǎn)移，如有肺轉(zhuǎn)移則計(jì)數(shù)肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)并分

4、級(jí)。
　　 結(jié)果：1、空白組、對(duì)照組裸鼠第7、14、21、28天血清中內(nèi)皮抑素、VEGF的濃度無明顯差異；Matrigel小體中的血紅蛋白濃度也無明顯差異。術(shù)后，原發(fā)瘤切除組血清中內(nèi)皮抑素、VEGF的濃度與未切除組(空白組、對(duì)照組)相比有明顯的下降(內(nèi)皮抑素為40.77±5.41ng/ml對(duì)123.18±5.94ng/ml、128.06±4.52ng/ml，P＜0.01；VEGF為71.43±9.15pg/ml對(duì)115.81±4

5、.38pg/ml、111.68±12.26pg/ml，P＜0.01)；原發(fā)瘤切除組Matrigel小體中的血紅蛋白濃度與未切除組相比有明顯的升高(36.55±2.35g/L對(duì)16.84±1.15g/L、16.29±1.10g/L，P＜0.01)。2、原發(fā)瘤切除組的肺轉(zhuǎn)移率與未切除組相比有明顯提高(80％對(duì)40％、35％，P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1、荷人骨肉瘤裸鼠原發(fā)瘤切除后，循環(huán)中的內(nèi)皮抑素與VEGF水平都有明顯下降，且內(nèi)