體外誘導BMSc在金屬腔隙內成骨的實驗研究.pdf

1、目的：本課題利用中空多孔金屬支架為骨組織再生工程構架，觀察體外骨髓基質干細胞(bone narrow mosonchymal stem cells，BMsc)在支架內、外的分化生長情況以及成骨的可能性，并探討體外應用骨誘導因子-骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(recombined human bono morphogenetic protein-2，rhBMP-2)提高成骨活性，促進金屬假體與骨質相對一體化結合的可行性，為研制中空多孔人工關節(jié)假體或

2、其他骨組織再生骨植入物提供基礎實驗依據．希望實驗結果能夠為生物固定的人工關節(jié)設計方法的改進提供一些理論及實驗依據。 方法：自行設計中空金屬試件，采用中空金屬試件(A組)、中空金屬試件假體+脫鈣骨基質(detalcified bone matrix DBM)(B組)、中空金屬試件+DBM+成骨誘導液(C組)、中空金屬假體+DBM +rhBMP-2培養(yǎng)液(D組)，金屬試件均為HA涂層，于BMSc混懸液中加10％胎牛血清DMEM培養(yǎng)液

3、培養(yǎng)，在2、4周觀察點取材，通過倒置相差顯微鏡、掃描電鏡、成骨細胞表型檢測等方法對中空金屬試件表面、脫鈣骨基質BMSc生長以及成骨分化進行觀察、鑒定。 使用SPSS15.0軟件包進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數±標準差表示，組問同一時間各指標比較采用組問方差分析。 結果：實驗發(fā)現(xiàn)：倒置相差顯微鏡、掃描電鏡等方法顯示中空金屬試件表面及試件內三維細胞支架上BMSc細胞黏附正常，經成骨誘導后轉為成骨細胞，并形成工程化組織。在實驗設

4、計的兩種骨誘導方式中，成骨細胞的表達以成骨誘導液為明顯，在統(tǒng)計學意義上其他對照組有明顯差異。 結論： 一、體外BMSc經誘導向成骨細胞分化，并可在中空金屬試件的空間結構中形成組織塊。 二、中空金屬假體的設計思路是可行的，在體外可以觀察到BMSc在金屬腔壁與腔內細胞支架之間緊密結合，并且在無細胞支架的情況下，1 mm孔洞可以形成細胞間的直接連接。 因此中空結構的假體是一個值得探索的方向，希望對生物復合型假體