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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察瞬時(shí)轉(zhuǎn)染特異性NF-κB/p65 siRNA后人胃癌細(xì)胞SGC-7901中NF-κB/p65,COX-2的表達(dá),探討RNA干擾NF-κB/p65對(duì)人胃癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響。 方法:分siRNA組、陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組三組,體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞SGC-7901,分別瞬時(shí)轉(zhuǎn)染特異性NF-κB/p65 siRNA,陰性對(duì)照siRNA,①轉(zhuǎn)染12、24、48小時(shí)后用MTT法檢測(cè)siRNA組、陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組細(xì)胞的增殖活
2、性。②轉(zhuǎn)染24、48小時(shí)后流式細(xì)胞儀分析三組細(xì)胞周期分布與凋亡的變化。③RT-PCR檢測(cè)三組細(xì)胞NF-κB/p65,COX-2的mRNA表達(dá)水平。④免疫組化法測(cè)上述三組NF-κB/p65,COX-2蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果:轉(zhuǎn)染NF-κB/p65特異性siRNA組細(xì)胞與兩對(duì)照組相比,①細(xì)胞生長(zhǎng)明顯減緩,細(xì)胞增殖活性明顯受到抑制(p<0.05)②細(xì)胞生長(zhǎng)阻滯于G1期,G0-G1期細(xì)胞比例增加,凋亡增多,凋亡率明顯上升(p<0.01)③
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