腫瘤壞死因子-α對(duì)完全弗氏佐劑致痛大鼠炎性痛敏的作用.pdf

1、目的： 1.通過觀察正常大鼠足底注射CFA炎性疼痛模型行為學(xué)改變和脊髓TNF-α的免疫組織化學(xué)，研究CFA所致炎性疼痛的特點(diǎn)和TNF-α表達(dá)的時(shí)程變化。 2.觀察鞘內(nèi)及腹腔注射抗TNF-α體單克隆抗體依那西普(Etanercept)對(duì)大鼠CFA所致炎性疼痛的影響，探討TNF-α在CFA所致炎性疼痛中的作用，并為此藥以后的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。 3.觀察神經(jīng)阻滯試驗(yàn)對(duì)脊TNF-α達(dá)的影響，研究細(xì)胞因子等炎癥介質(zhì)的傳

2、入方式。 方法： 1.健康成年雄性SD大鼠48只，隨機(jī)分六組(1h、3h、1d、3d、7d、14d，n=8)。左足注射CFA后，在各時(shí)間點(diǎn)測(cè)大鼠左足50％縮足閾值。行為學(xué)測(cè)試完畢后，取大鼠胸、腰段脊髓，腰段為與坐骨神經(jīng)相連節(jié)段。用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)TNF-α表達(dá)的變化。 2.健康成年雄性SD大鼠48只，隨機(jī)分為八組(n=6)。A組，腹腔注射NS；B組，腹腔注射Etanercept；C組，腹腔注射NS，足底注射C

3、FA；D組，腹腔注射Etanercept，足底注射CFA；E組，鞘內(nèi)注射NS，足底不注射CFA；F組，鞘內(nèi)注射Etanercept，足底不注射CFA；G組，鞘內(nèi)注射NS，足底注射CFA；H組，鞘內(nèi)注射Etanercept，足底注射CFA。在各時(shí)間點(diǎn)測(cè)大鼠左足50％縮足閾值。 3.健康成年雄性SD大鼠8只，在大鼠足底注射CFA之前10分鐘進(jìn)行坐骨神經(jīng)阻滯。3小時(shí)后取大鼠胸、腰段脊髓，腰段為與坐骨神經(jīng)相連節(jié)段，用免疫組織化學(xué)方法檢T

4、NF-α的表達(dá)。 結(jié)果： 1.CFA致痛后各時(shí)間點(diǎn)大鼠痛閡均顯著低于致痛前(P<0.05)，其中以致痛后1天痛閾降低最為顯著，以后痛閾逐漸升高，14天后痛閾恢復(fù)至基礎(chǔ)值的60％左右。大鼠足底注射CFA后3小時(shí)TNF-α表達(dá)較對(duì)側(cè)低(p<0.05)，TNF-α表達(dá)的峰值在足底注射CFA后第三天。注射后14天，TNF的表達(dá)與空白組接近。通過免疫雙標(biāo)觀察，TNF-α主要表達(dá)在神經(jīng)元上，星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞有少量表達(dá)。

5、 2.腹腔注射和鞘內(nèi)注射Etanercept均可減輕CFA致痛大鼠的痛閾(P<0.05)，兩者間無明顯差異(P>0.05)。 3.坐骨神經(jīng)阻滯后大鼠脊髓TNF-α陽性細(xì)胞光密度(optic density，OD)與對(duì)照側(cè)相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，與未進(jìn)行坐骨神經(jīng)阻滯的CFA致痛大鼠致痛側(cè)相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1.CFA致痛大鼠可引起行為學(xué)和脊髓后角的TNF-α表達(dá)呈特定的時(shí)空模