鞘內(nèi)注射腫瘤壞死因子-α單克隆抗體緩解大鼠骨癌痛的作用機(jī)制研究.pdf

1、本文主要從以下兩個(gè)部分展開(kāi)論述：
　　第一部分 鞘內(nèi)注射腫瘤壞死因子-α單克隆抗體對(duì)骨癌痛大鼠機(jī)械痛敏的影響
　　目的：探討腫瘤壞死因子-α(TNF-α)單克隆抗體對(duì)癌痛模型大鼠骨癌痛機(jī)械性刺激痛敏反應(yīng)閾值的影響。
　　方法：挑選體重在180～200g左右SD大鼠共32只，隨機(jī)原則分成4個(gè)組(n=8):骨癌痛組、假手術(shù)組、TNF-α單克隆抗體組、腫瘤對(duì)照組。大鼠骨癌痛模型采用左側(cè)脛骨近端骨髓腔注射Walker256腫瘤

2、細(xì)胞懸液10μL(2×107)的方法制備，假手術(shù)組注射10μL生理鹽水，其余三組分別注射Walker256腫瘤細(xì)胞懸液。在建模的第11天，TNF-α單克隆抗體組鞘內(nèi)連續(xù)7d注射依那西普（TNF-α單克隆抗體）8μL，腫瘤對(duì)照組鞘內(nèi)連續(xù)7d注射生理鹽水8μL，骨癌痛組和假手術(shù)組不進(jìn)行鞘內(nèi)注射。在建模前、建模后1d、3d、5d、7d、10d、14d、17d和鞘內(nèi)給藥前、給藥后0.5h、1h、2h、4h、6h、8h分別用von Frey細(xì)絲測(cè)

3、定大鼠左側(cè)后爪機(jī)械縮足反射閾值。
　　結(jié)果：建模后7天骨癌痛組、TNF-α單克隆抗體組、腫瘤對(duì)照組大鼠開(kāi)始出現(xiàn)機(jī)械性刺激痛敏反應(yīng)閾值下降;接種后第10天該三組大鼠的機(jī)械痛閾與假手術(shù)組相比明顯降低(P＜0.05)，且隨時(shí)間延長(zhǎng)呈降低趨勢(shì);鞘內(nèi)注射TNF-α單克隆抗體后0.5h、1h、2h、4h、6h大鼠左側(cè)后肢機(jī)械痛閾升高(P＜0.05)，8h后恢復(fù)到給藥前水平，鞘內(nèi)注射后1～4 h是TNF-α單克隆抗體作用的高峰期，在藥物作用高峰

4、期大鼠左側(cè)后肢機(jī)械痛閾基本能恢復(fù)到基礎(chǔ)值。連續(xù)鞘內(nèi)給藥7d，大鼠仍出現(xiàn)相似的行為學(xué)變化，但機(jī)械痛閾值升高程度較第一次給藥降低。
　　結(jié)論：TNF-α單克隆抗體可以抑制大鼠脛骨癌痛引起的機(jī)械性刺激痛敏。
　　第二部分 鞘內(nèi)注射TNF-α單克隆抗體對(duì)骨癌痛大鼠脊髓背根神經(jīng)節(jié)電壓門控鈉離子通道1.8表達(dá)的影響
　　目的：觀察骨癌痛大鼠鞘內(nèi)注射TNF-α單克隆抗體后脊髓背根神經(jīng)節(jié)電壓門控鈉離子通道1.8表達(dá)的變化。探討鞘內(nèi)注射

5、TNF-α單克隆抗體對(duì)骨癌痛大鼠的可能機(jī)制。
　　方法：挑選體重在180～200g左右SD大鼠共24只，隨機(jī)原則分成4個(gè)組(n=6):骨癌痛組、假手術(shù)組、TNF-α單克隆抗體組、腫瘤對(duì)照組。大鼠骨癌痛模型采用左側(cè)脛骨近端骨髓腔注射Walker256腫瘤細(xì)胞懸液10μL(2×107)的方法制備，假手術(shù)組注射10μL生理鹽水，其余三組采用左側(cè)脛骨近端骨髓腔注射Walker256腫瘤細(xì)胞懸液10μL(2×107)。在建模的第11天，TN

6、F-α單克隆抗體組鞘內(nèi)連續(xù)7d注射依那西普（TNF-α單克隆抗體）8μL，腫瘤對(duì)照組鞘內(nèi)連續(xù)7d注射生理鹽水8μL，骨癌痛組和假手術(shù)組不進(jìn)行鞘內(nèi)注射。第17天取大鼠左側(cè)背根神經(jīng)節(jié)（DRG,腰2-腰5段）測(cè)定電壓門控鈉離子通道1.8(NaV1.8)的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：與假手術(shù)組相比，骨癌痛組大鼠DRG Nav1.8表達(dá)明顯升高（P＜0.05）;與腫瘤對(duì)照組相比，TNF-α單克隆抗體組大鼠DRG NaV1.8的表達(dá)明顯降低(P＜0