UCP5在腦梗塞大鼠腦組織中的動(dòng)態(tài)表達(dá).pdf

1、目的:
　　本研究基于建立大鼠永久性大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)缺血模型，通過(guò)應(yīng)用神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分、腦組織TTC染色及病理學(xué)觀察對(duì)大鼠腦缺血模型給予評(píng)價(jià)，探索局灶性腦缺血后大鼠腦組織中解偶聯(lián)蛋白5(uncoupling protein5，UCP5)的表達(dá)情況，以進(jìn)一步探討腦梗塞后腦損傷的可能機(jī)制。
　　方法:
　　選用健康雄性Sprague-Dawley大鼠，體重250g～300g，運(yùn)用血管內(nèi)栓線方法制作大鼠左側(cè)MCA

2、O腦缺血模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字法）分為假手術(shù)對(duì)照組(n=7)和缺血組(n=60)，缺血組又分為5個(gè)缺血亞組:缺血6小時(shí)組(n=12)、缺血12小時(shí)組(n=12)、缺血1天組(n=12)、缺血3天組(n=12)及缺血7天組(n=12)，缺血組于SD大鼠術(shù)后清醒（術(shù)后3小時(shí)）行神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分，如有造模不成功或死亡，則隨機(jī)補(bǔ)充。分別從假手術(shù)對(duì)照組及5個(gè)缺血亞組（缺血6小時(shí)、12小時(shí)、1天、3天、7天）中隨機(jī)抽取2只SD大鼠進(jìn)行斷頭處

3、理，快速取出腦組織，切片后置于2％的2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)中染色，以觀察腦組織梗塞灶，各組其余SD大鼠均斷頭處理后完整取出腦組織，經(jīng)多聚甲醛溶液浸泡固定后制作石蠟切片，然后行HE染色及免疫組織化學(xué)染色以觀察大腦腦梗塞后腦組織細(xì)胞病理學(xué)變化及UCP5的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1、冠狀位腦切片經(jīng)TTC染色后，正常腦組織顯示鮮紅色，梗死區(qū)腦組織顯示蒼白色，在假手術(shù)組中未見(jiàn)蒼白色梗死灶，在腦缺血6小時(shí)組、12小時(shí)

4、組、1天組、3天組、7天組中均可見(jiàn)蒼白色梗死區(qū)域。
　　2、HE染色顯示在假手術(shù)組中未見(jiàn)腦組織結(jié)構(gòu)及神經(jīng)元異常改變，在腦缺血6小時(shí)組、12小時(shí)組、1天組、3天組、7天組SD大鼠梗塞灶側(cè)腦組織中可見(jiàn)壞死區(qū)域，缺血中心區(qū)的神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞等正常組織結(jié)構(gòu)消失，細(xì)胞出現(xiàn)腫脹，核碎裂等現(xiàn)象;位于缺血半影區(qū)的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞變性及數(shù)目減少，胞質(zhì)可呈嗜酸性改變及神經(jīng)基質(zhì)腫脹等現(xiàn)象。
　　3、UCP5在腦缺血6小時(shí)組、12小時(shí)組、1

5、天組、3天組、7天組中均檢測(cè)到陽(yáng)性表達(dá);在假手術(shù)組中偶見(jiàn)少量陽(yáng)性表達(dá)神經(jīng)細(xì)胞。腦缺血6小時(shí)組、12小時(shí)組、1天組、3天組、7天組分別與假手術(shù)對(duì)照組進(jìn)行比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，缺血各組UCP5陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)明顯高于假手術(shù)對(duì)照組，具有顯著差異(P＜0.001)。
　　4、在腦缺血6小時(shí)組、12小時(shí)組、1天組、3天組、7天組之間進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果示缺血6小時(shí)組腦組織UCP5表達(dá)升高，缺血12小時(shí)組腦組織UCP5表達(dá)繼續(xù)增高，于缺血1天組UC