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1、目的:探討蛋白偶聯(lián)雌激素受體(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)介導(dǎo)雌激素對(duì)人乳癌細(xì)胞系SKBR-3增殖的影響。
方法:激光共聚焦顯微鏡掃描檢測(cè)鈣離子探針標(biāo)記的細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度隨時(shí)間的變化,CCK-8法觀察測(cè)量細(xì)胞的增殖生長(zhǎng),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期,Western blot檢測(cè)磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(phospho-extracellular regulate ekinase,
2、p-ERK)的相對(duì)表達(dá)量。
結(jié)果:17-β雌二醇(E2)與GPER激動(dòng)劑(G1)刺激SKBR-3細(xì)胞后,細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度從120s開(kāi)始迅速升高,細(xì)胞增殖與對(duì)照組相比顯著增加,CCK-8測(cè)定的相對(duì)細(xì)胞數(shù)分別是對(duì)照組的(2.08±0.07)倍和(2.0±0.04)倍,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞S期及G2~M期即增殖指數(shù)PI(43.12%±0.38%,42.43%±0.52%)較對(duì)照組(29.19%±0.29%)增加(P<0.05),Wes
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